第06章 酶分子修饰PPT.ppt

什么是酶分子修饰？;酶分子修饰的意义; 第一节 酶的化学修饰;一、化学修饰分类;1、主链切断修饰;;胰蛋白酶原的激活;胰凝乳蛋白酶原的激活 ;2、主链连接修饰;（二）酶分子侧链基团修饰;分子内交联修饰;（三） 酶的大分子修饰;非共价修饰;用可溶性大分子，如聚乙二醇、右旋糖苷、肝素等，通过共价键连接于酶分子的表面，形成一层覆盖层。;大分子修饰(共价)的过程;应用最广的修饰剂;将酶分子肽链上的某一个氨基酸换成另一个氨基酸的修饰方法称为氨基酸置换修饰;氨基酸或核苷酸的置换修饰可以采用化学修饰方法 例如，Bender等成功地利用化学修饰法将枯草杆菌蛋白酶活性中心的丝氨酸转换为半胱氨酸，修饰后，该酶失去对蛋白质和多肽的水解能力，却出现了催化硝基苯酯等底物水解的活性。 化学修饰法难度大，成本高，专一性差，而且要对酶分子逐个进行修饰，操作复杂，难以工业化生产。 ;2.定点突变法氨基酸置换; ;（五）金属离子置换修饰;1、概念;2、作用范围;3、常用金属离子;4、金属离子置换修饰的过程 ;（六）亲和修饰;二、酶修饰后的性质变化;三、化学修饰方法的几个问题;四、酶化学修饰的应用;五、酶蛋白化学修饰的局限性;第二节 酶分子的物理修饰 ;变性、诱导与构象重建 （对酶高级结构调整）;;第三节 蛋白质工程和酶的定向进化 （基因水平上进行蛋白质改造）;蛋白质工程——以重组DNA技术为基础，结合X-衍射分析技术、蛋白质溶液构象理论及计算机辅助设计发展起来的一种定点定位修饰技术体系，也是在基因水平进行蛋白质改造的技术科学。 ;1、蛋白质工程的主要目标 ;2、酶蛋白质工程所需基本信息 ;3、酶蛋白质工程的流程;4、酶蛋白质工程的前景;二、酶的定向进化;1、定向进化的原理;2、定向进化示意图;3、随机突变的策略;4、定向进化不是定点突变;5、酶体外定向进化的意义;