第五章-植物细胞制药PPT.ppt

生物技术制药;第六章 植物细胞工程制药;植物细胞工程定义： 以植物细胞为基本单位，应用细胞生物学、分子生物学等理论和技术，在离体条件下进行培养、繁殖或人为的精细操作，使细胞的某些生物学特性按人们的意愿发生改变，从而改良品种、制造新品种、加速繁育植物个体或获得有用物质的一门科学或技术称为植物细胞工程。 上游工程，下游工程。;第一节 基本概念;一、基本概念;3、植物的分化 高等植物的分化可以分为胚胎发生和器官发生两个阶段。 前者是从精子与卵细胞结合开始，分化为幼胚，进而发育成成熟胚和种子。种子在适宜的条件下萌发，通过器官分化过程，形成根、茎、叶、花和果实。 4、脱分化 已经分化的细胞、组织和器官在人工培养的条件下又变成未分化的细胞和组织的过程。 ;5、再分化 通过脱分化诱导形成的愈伤组织在适宜的培养条件下可再分化成为胚状体或直接分化出器官。 两个途径：由体细胞或性细胞，通过脱分化形成胚状体；通过愈伤组织直接形成胚状体。 6、愈伤组织Callus：由母体外植体组织的增生细胞产生的不定型的疏松排列的薄壁细胞，愈伤组织培养中一般无明显的组织或器官上的分化。 ;7、悬浮培养;8、细胞培养;9、分生组织培养;10、外植体;11、器官形成;12、无性繁殖系;13、突变体;14、继代培养;15、次级代谢和次级代谢产物;第二节 植物细胞培养的发展简史;40年代，植物细胞培养与培养的营养要求相联系。Steward发现椰子汁在胡罗卜组织培养中具有明显的刺激生长的效应。 50年代进入发展时期： （1）Skoog和崔徵发现腺嘌呤、腺苷能解除培养基中IAA对芽形成的抑制作用。并具有诱导芽形成的能力。确立了腺嘌呤/生长素的比是控制芽和根形成的主要条件，比例高，有利于芽的形成，低有利于根的形成。 （2）Miller发现：激动素Kinetin具有很强的促进芽形成能力，提出激动素/生长素比理论。 （3）Steward：植物细胞全能性理论的首次实验证实，胡罗卜悬浮培养细胞诱导胚状体，形成完整植株。对培养中细胞的生长和分化规律已有所认识。;六十年代至今为发展新时期 特点：与现代遗传学和分子生物学相结合，形成体细胞遗传学，细胞工程学和植物遗传工程： （1）花药培养与单倍体育种。 （2）分离原生质体新方法和细胞杂交。 （3）植物遗传工程。 自此植物器官与营养需求之间关系研究、原生质体、培养基以及培养方法的研究获得了高度重视，基因工程技术也被用于植物次级代谢产物的生产中。 ;第三节 植物细胞的形态和生理特性;二、植物细胞的结构特征;三、细胞的主要生理活性物质及其他化学组分;1、生理活性物质;1、生理活性物质;1、生理活性物质;1、生理活性物质;2、其它成分 （1）生物碱 生物碱（alkaloide）是一类含氮的有机化合物，广布于植物界。含生物碱较多的植物科有：茄科、罂粟科、小檗科、豆科、夹竹桃科等。按照植物化学分类学的观点，亲缘关系相近的植物，常含有化学结构相似的成分。此外，一种植物所含的同一类成分中也经常存在多种化学成分，如人参中含有几十种人参皂苷。它们均属于三萜皂苷类成分。中草药中含有多种生物碱，如麻黄碱、咖啡、阿托品、喹啉、黄连素等，其生理活性都很强。;;2、其它成分 （3）挥发油 挥发油（volatile oil）是一类具有芳香气味，在常温下易于挥发的油类。在伞形科、姜科、唇形科等植物中多有分布。很多挥发油可作药用，如薄荷油、丁香油、桉油等。;2、其它成分 （4）有机酸 有机酸（organic acids）是糖类代谢的中间产物。植物果实中酸味以及细胞液的酸性反应，主要是由于有机酸的存在。常见的植物有机酸有：苹果酸、柠檬酸、水杨酸、酒石酸等。;四、植物培养细胞的生理特性;四、植物培养细胞的生理特性;四、植物培养细胞的生理特性;四、植物培养细胞的生理特性;四、植物培养细胞的生理特性;四、植物培养细胞的生理特性;四、植物培养细胞的生理特性;四、植物培养细胞的生理特性;第四节 植物细胞培养的基本技术;一、植物材料的准备;常用灭菌剂的效果比较;植物不同组织（器官）的灭菌时间和步骤;一、植物材料的准备;二、培养基的及其组成;1、无机盐;2、碳源;3、植物生长调节剂;4、有机氮源;5、维生素;三、培养方法;三、培养方法;三、培养方法;三、培养方法;三、培养方法;三、培养方法;三、培养方法;第五节 影响植物次级代谢产物累积的因素;一、外植体选择;二、培养条件的影响;二、培养条件的影响;（3）碳源 ：碳源通常以光自养培养中的CO2或异养培养中的糖类两种形式提供，其性质和数量往往对培养细胞的生物量有很大的影响。CO2可以诱导某些特征反应，如在金苹果的悬浮细胞培养中，高浓度CO2可产生一种特有的苹果香味。 植物细胞培养中使用最多的碳源是糖类，对次级代谢产物的影响主要取决于所使用的