第十章核酸和蛋白质的生物合成PPT.ppt

起始氨基酰tRNA结合到小亚基 S-D 核蛋白体大亚基结合形成起始复合物 IF-2 GDP PPi IF-3 IF-1 肽链合成的起始 30S亚基? mRNA IF3- IF1复合物 30S? mRNA ? GTP- fMet –tRNAfMet- IF2- IF1复合物 70S起始复合物 codon anticodon A位 P位 mRNA +30S亚基-IF3 A位 IF-3 5? 3? IF2 GTP P位 IF3 IF2 IF1 IF2-GTP-fMet-tRNAfMet IF3 50S亚基 IF2+ IF1+GDP+Pi IF-1 IF1 70S起始复合物 1 合成的起始 （1）甲酰甲硫氨酰-tRNA（ fMet-tRNAfMet ）的合成 起始密码为AUG 在原核细胞中，它代表N-甲酰甲硫氨酸（fMet） 在真核细胞中，它代表甲硫氨酸 甲酰甲硫氨酰-tRNA（fMet-tRNAfMet）的形成 CHO-HN-CH-COO-tRNA CH2 CH2 S COO- +H2N-CH-COO-tRNA CH2 CH2 S COO- Met-tRNAfMet fMet-tRNAfMet N10-甲酰-FH4 FH4 转甲酰酶 Met的甲酰化是在Met-tRNAfMet合成后，由转甲酰基酶催化，从N-10-甲酰四氢叶酸（fTHF）上将甲酰基转移到甲硫氨酸的NH3+基上形成。但转甲酰酶不会催化组成肽链中的甲硫氨酸甲酰化 所生成的fMet-tRNAfMet可识别mRNA上的AUG，其它氨酰-tRNA不能 fMet-tRNAfMet 能特异地携带着fMet直接进入核糖体的P位而不是先占A位点（通常氨酰-tRNA都先进入A位点，当肽链形成后才移到P位点） （2）起始复合物（initiation complex）的形成 30s复合物的形成：在起始因子IF1、IF2、IF3由mRNA与核糖体的小亚基及甲酰甲硫氨酰-tRNA （fMet-tRNAfMet）形成30s复合体， 70s复合物的形成：形成的30s复合体再与50s大亚基结合，在GTP供能的情况下，形成70s复合物，并释放各种起始因子。此时， fMet-tRNAfMet结合在核糖体的P位，而A位空着 翻译起始信号 作为起始密码子的AUG通常离mRNA5’-末端约20-30个碱基，在这段前导顺序中，具有一段特殊顺序AGGAGGU，位于起始AUG之前的固定的位置上 mRNA上的AGGAGGU区域称为Shine-Dalgano顺序或SD序列 （3）肽链的延伸-进位、转肽（成键）、移位 ①进位 氨基酸以活化的AA-tRNA的形式进入A位，此时要有GTP水解供能及延长因子EF-Tu（识别tRNA是否氨酰化）、EF-Ts的帮助才能完成 Tu Ts GTP 是指根据mRNA下一组遗传密码指导，使氨基酰－tRNA进入核蛋白体A位 fMet GTP Tu GDP Ts GTP fMet ②转肽（成键） 在转肽酶的作用下，使P位的氨基酸（fMet）以其-COOH与A位的氨基酸形成肽键 形成肽键后，原来的P位的tRNA成为空载，而A位不再是氨基酸而是二肽 转肽后P位的空载tRNA脱落，为移位做好准备 E位 fMet 是转肽酶催化的肽键形成的过程 ③移位 在移位酶(EF-G)及GTP的帮助下，核糖体在mRNA上移动一个密码子的距离，方向是5’-3’。使二肽-tRNA进入P位，而A位空出 E位 fMet 在转位酶的作用下，促进核糖体向mRNA的3‘测移动，使新形成的肽酰tRNA和mRNA相对位移由A位进入核蛋白体P位，而卸载的tRNA进入E位 E位 fMet AA3 Tu GTP 肽链的延长 1 2 1 2 2 3 2 3 进位 肽键形成 移位 进位 (Tu\Ts) GTP GTP N-端 2 3 5′ 3′ C-端 肽键形成 1 5′ 3′ （EF-G） 进位 转肽 移位 （3）肽链合成的终止和释放 当mRNA的终止密码（UAA、UAG）进入A位时，肽链合成要终止 终止因子与A位结合，识别终止密码 转肽酶转化为水解酶，水解肽酰-tRNA并释放出肽链 tRNA从P位脱落，大小亚基从模板上解离下来 IF3与30S亚基结合，防止30S亚基与50S亚基立即结合（IF3-30S又可以用于多肽链合成，从而构成核糖体循环） 肽链合成的终止及释放 （1）终止（释放）因子RF1或RF2进入核糖体A位。 （2）多肽链的释放 （3）70S核糖体解离 5? 3? UAG 30S亚基 50S亚基 5? 3? UAG tRNA RF RF 多核糖体与核糖体循环 合成完毕的肽链 多核糖体 3ˊmRNA 延伸中