第十二章 病毒的分子生物学PPT.ppt

(3)可以感染不同类型细胞，易于进行体外培养，病毒感染细胞滴度高，可在细胞内有效复制。 (4)腺病毒感染细胞后可以高水平的表达蛋白，在感染后期，宿主基因表达被关闭，易于高水平表达外源基因。 12.3 RNA病毒的分子生物学 RNA病毒基因组均呈线状，有单双链之分，有单一分子，也有的基因组是分段的。RNA的二级结构对病毒基因表达调控有重要影响。 下面介绍一种典型的RNA病毒，黄病毒科丙型肝炎病毒属的成员——丙型肝炎病毒(HCV)。 12.3.1 HCV的发现 丙型肝炎病毒HCV(hepatitis C virus) 是应用分子生物学技术对病毒进行研究的成功实例。 12.3.2 HCV基因组的结构与功能 HCV是有外膜的单正链RNA病毒，基因组长约l0000 nt。HCV仅有一个几乎为全基因组长度的翻译可读框ORF，编码3010~3033个AA的多聚蛋白，经过蛋白酶加工，切割成结构蛋白和调节蛋白。许多黑猩猩和人类HCV毒株已被完全测序。 12.3.3 HCV基因组的复制 12.4 反转录病毒的分子生物学 反转录病毒基因组是线形正链RNA, 正链RNA没有mRNA活性，需要在自身的反转录酶的作用下，将正链RNA反转录成双链DNA，通过向宿主细胞基因组的整合，在宿主细胞RNA聚合酶的作用下转录出mRNA。 人类免疫缺陷病毒(HIV)是最典型也是最重要的反转录病毒。以下简要介绍HIV的分子生物学。 12.4.1 艾滋病与HIV 艾滋病是一种导致以全身免疫系统严重损害为特征的传染性疾病，人类免疫缺陷病毒(HIV)是其病原体，感染者终生携带病毒，目前缺乏有效的治疗手段。 第十二章 病毒的分子生物学 12.1 病毒分子生物学研究的内容 病毒分子生物学是用现代分子生物学的新理论、新技术和新方法对病毒基因组的结构与功能，基因组的复制、表达和调控，病毒与宿主的相互作用关系等进行研究的一门学科。 人类对病毒的研究成果在现代分子生物学的发展史上，做出了重大的贡献。许多分子生物学上的重大突破都是以病毒作为模式或研究材料而进行的。 其研究成果除了揭示许多重要的分子生物学过程之外，对人类认识病毒感染、致病的分子本质，为病毒引起疾病的诊断、预防和治疗提供了理论基础，促进了基因工程疫苗和抗病毒药物的研制和发展。 病毒分子生物学研究领域 12.1.1 病毒基因组的结构 12.1.2 病毒基因组的复制和表达调控 12.1.3 病毒对宿主细胞的影响 12.1.4 病毒与肿瘤发生 12.1.5 病毒的基因工程疫苗与病毒载体 从核酸结构上看，有的是单链核酸，有的是双链核酸，有的是线状，有的是环状。 一些单链RNA病毒的基因组还具有不同的极性，有的是正链RNA，有的是负链RNA。 有的正链RNA病毒基因组5′端有帽子结构，也有的正链RNA病毒基因组3′端有poly(A)尾结构。 相对于能独立生活的微生物来说，病毒的基因组非常简单。病毒核酸的相对分子质量约为1.6×107～1.6×108，仅为一般细菌基因组的1‰～l/10。 12.1.2 病毒基因组的复制和表达调控 病毒进入活的易感宿主细胞后，借助于宿主细胞本身提供的原料、能量、酶等，以自我复制的方式进行繁殖。 病毒基因的表达包括转录和翻译两个过程。 正链RNA病毒的基因组除了作为模板复制出子代RNA之外，还有mRNA的作用。作为翻译的模板，一般先翻译出单一的大分子肽链，然后再由蛋白酶降解为不同功能的结构蛋白等。 负链RNA病毒的基因组无mRNA的功能，必须由复制出的互补RNA(cRNA)来发挥mRNA的作用。 12.1.3 病毒对宿主细胞的影响 病毒只能在活细胞中存活，因此，病毒与宿主细胞之间有着十分密切的关系。病毒利用宿主细胞的细胞器、能量和酶等进行自身的复制，并通过宿主细胞的蛋白表达系统来表达自身所需的蛋白质，这些过程都将会对宿主细胞的形态和功能产生重大的影响。 病毒对宿主细胞的影响主要体现在病毒对宿主细胞形态和结构的影响以及病毒对宿主细胞功能的影响两个方面。 12.1.4 病毒与肿瘤发生 人类和动物肿瘤的形成除了与遗传和环境因素相关外，某些DNA和RNA病毒也可以通过不同的机制诱发恶性肿瘤。 有些病毒直接作用于细胞的基因组，使细胞增殖，最终导致肿瘤形成；有些病毒则通过抑制机体的免疫系统，诱导细胞恶性转变，形成肿瘤。 有些病毒常伴随一些特定肿瘤的发生，但它们与肿瘤的关系还未得到确认.例如在艾滋病病人中引发的Kaposi‘s肉瘤。 总之，大约15%的恶性肿瘤与病毒有关，因此研究肿瘤的病毒病因具有十分重要的意义。 12.1.5 病毒基因工程疫苗与病毒载体 基因工程疫苗是指用基因工程的方法，表达病原微生物的一段基因序列，将表达产物(多数