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第四章 动物细胞大规模培养技术PPT
* * 第四章 动物细胞大规模培养技术 大规模培养技术应用简介 大规模培养常用方法 大规模培养技术的操作方式 第一节大规模培养技术应用简介 概念 动物细胞大规模培养技术（large-scale culture technology）是指在人工条件下（设定ph、温度、溶氧等），在细胞生物反应器（bioreactor）中高密度大量培养动物细胞用于生产生物制品的技术 一、用于大规模培养的细胞 目前可大规模培养的动物细胞有鸡胚、猪肾、猴肾、地鼠肾等多种原代细胞及人二倍体细胞、cho（中华仓鼠卵巢）细胞、BHK-21(仓鼠肾细胞)、Vero细胞(非洲绿猴肾传代细胞，是贴壁依赖的成纤维细胞)等 二、大规模细胞培养技术的发展 使用转瓶(roller bottle) 、CellCube等贴壁细胞培养，发展为生物反应器（Bioreactor）进行大规模细胞培养。第一代细胞培养技术核心问题是难以产业化或者说是规模化生产： 在工艺生产时不能大规模制备产品 非批量生产容易导致产品质量的不均一性 难以对同批生产进行生产和质量控制。 第二节 大规模培养常用方法 根据动物细胞的类型，可采用贴壁培养、悬浮培养和固定化培养等三种培养方法进行大规模培养 一、动物细胞生长特性及培养温度 1.细胞生长缓慢，易污染，培养需用抗生素 2.细胞大，无细胞壁，机械强度低，环境适应性差 3.需氧少，不耐受强力通风与搅拌 4.群体生长效应，贴壁生长（锚地依赖性） 5.培养过程产品分布细胞内外，成本高 6.原代培养细胞一般繁殖50代即退化死亡 贴壁依赖型细胞：需要附着于带适量电荷的固体或半固体表面才能生长，大多数动物细胞，包括非淋巴组织细胞和许多异倍体细胞均属于这一类。 非贴壁依赖型细胞：无需附着于固相表面即可生长，包括血液、淋巴组织细胞、许多肿瘤细胞及某些转化细胞 二、贴壁培养（attachment culture）是指细胞贴附在一定的固相表面进行的培养 2.贴壁培养的优点： ● 容易更换培养液；细胞紧密黏附于固相表面，可直接倾去旧培养液，清洗后直接加入新培养液。 ● 容易采用灌注培养，从而达到提高细胞密度的目的；因细胞固定表面，不需过滤系统。 ● 当细胞贴壁于生长基质时，很多细胞将更有效的表达一种产品。 ● 同一设备可采用不同的培养液/细胞的比例。 ● 适用于所有类型细胞。 *
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