图解：Cx37-PCR引物的寻找.docVIP

Cx37的引物设计和验证过程 在pubmed中寻找Cx37编码序列 /pubmed/ 编码序列（CDS） at gggtgactgg ggcttcctgg agaagttgct 121 ggaccaggtc caggagcact cgaccgtggt gggtaagatc tggctgacgg tgctcttcat 181 cttccgcatc ctcatcctgg gcctggccgg cgagtcagtg tggggtgacg agcaatcaga 241 tttcgagtgt aacacggccc agccaggctg caccaacgtc tgctatgacc aggccttccc 301 catctcccac atccgctact gggtgctgca gttcctcttc gtcagcacac ccaccctggt 361 ctacctgggc catgtcattt acctgtctcg gcgagaagag cggctgcggc agaaggaggg 421 ggagctgcgg gcactgccgg ccaaggaccc acaggtggag cgggcgctgg cggccgtaga 481 gcgtcagatg gccaagatct cggtggcaga agatggtcgc ctgcgcatcc gcggagcact 541 gatgggcacc tatgtcgcca gtgtgctctg caagagtgtg ctagaggcag gcttcctcta 601 tggccagtgg cgcctgtacg gctggaccat ggagcccgtg tttgtgtgcc agcgagcacc 661 ctgcccctac ctcgtggact gctttgtctc tcgccccacg gagaagacca tcttcatcat 721 cttcatgttg gtggttggac tcatctccct ggtgcttaac ctgctggagt tggtgcacct 781 gctgtgtcgc tgcctcagcc gggggatgag ggcacggcaa ggccaagacg cacccccgac 841 ccagggcacc tcctcagacc cttacacgga ccaggtcttc ttctacctcc ccgtgggcca 901 ggggccctca tccccaccat gccccaccta caatgggctc tcatccagtg agcagaactg 961 ggccaacctg accacagagg agaggctggc gtcttccagg ccccctctct tcctggaccc 1021 accccctcag aatggccaaa aacccccaag tcgtcccagc agctctgctt ctaagaagca 1081 gtatgtatag （2）进入primer5.0界面 得到引物：产物239bp Tm 56.3 上游5’ATGGAGCCCGTGTTTGTG3’ 下游5’GTGTAAGGGTCTGAGGAGGTG3’ 注意引物设计原则： 1、3’端不要以A结尾，3’不要出现连续的3个碱基相连的情况，比如GGG或 CCC，否则容易引起错配。Tm应该在55～70度之间，GC％应该在45％～55％间，上下游引物的Tm值最好不要相差太多，大概在2度以下较好。/Blast.cgi?PROGRAM=blastnBLAST_PROGRAMS=megaBlastPAGE_TYPE=BlastSearchSHOW_DEFAULTS=onLINK_LOC=blasthome 施工期由于建筑材料堆放、管理不当，特别是易流失的物资如黄沙、土方等露天堆放，遇暴雨时将可能被冲刷进入水体，造成物质损失和污染水体。同时建材的散落，也易随雨水进入水体，但只要施工单位对运输、施工作业严加管理，这部分的建材流失可以尽量地减少。本项目弃土弃渣不单独设置临时堆场，开挖弃土弃渣土石料堆放量较少，堆放于道路中央，及时清运，日产日清，在加强施工物料管理的基础上，施工期物料流失对水环境的影响可降到最低水平，不会对水体造成较大影响。本项目涉水施工属于短暂性施工，加上水体的自净和恢复能力较快，对水体水质的影响也属于短暂的影响。同时，在施工过程中通过加强管理，于施工岸边设置沉淀池对泥浆进行沉淀处理后上清液作为洒水抑尘用水进行综合利用。采取上述措施后，可将项目施工对水体扰动影响将至最低，对水质影响可接受。施工期间的噪