酶学基础蛋白质工程PPT课件.pptVIP

第五章 酶学基础;酶工程的概念;;培养室;一、酶的概念与发展史;;;蛋白类酶的分类：;1．氧化还原酶 (Oxidoreductase);2．转移酶(Transferase);3．水解酶(Hydrolase);4．裂合酶(Lyase);5．异构酶(Isomerase);6．连接酶（合成酶）(Ligase or Synthetase);核酸类酶的命名;7.核酸酶（催化核酸） Ribozyme;二、酶的催化共性 ;专一性强;;效率高;作用条件温和;;A---B;酶催化反应历程;对酶催化反应过程的机理，得到大量实验结果支持的是活性中间复合物学说，该学说认为酶催化反应至少包括两步，首先是底物S和酶E相结合形成中间复合物[ES]，然后该复合物分解成产物P，并释放出酶E。 例如：酶反应 其反应机理可表示为 ;根据化学动力学，反应速率通常以单位时间、单位反应体系中某一组分的变量来表示。对均相酶的催化反应，单位反应体系常用单位体积表示。 反应的速率可表示为 rs：底物S的消耗速率（mol/L﹒s） rp：产物P生成速率（mol/L﹒s） v：反应体系的体积（L） ns、np：底物S和产物P的质量（mol） t：时间（s） ; 根据质量作用定律，P的生成速率可表示为： 速率控制步骤在反应动力学中是一个重要的概念。在一个多步骤的反应体系中，其中反应速率最慢的一步称为速率的控制步骤，并且控制步骤的速率决定了该反应的速率。 ;“拟稳态”假设。 认为由于反应体系中底物浓度要比酶的浓度高得多，中间复合物分解时所得到的酶又立即与底物相结合，从而使反应体系中复合物的浓度维持不变，即中间复合物的浓度不再随时间而变化。 ;用稳态近似法处理;酶催化反应的速率方程;米氏常数 KM;0.2;km值是酶的特性常数，代表反应速率为最大反应速率一半时的基质浓度，其单位为浓度单位。 它和酶的浓度无关，但和温度、pH等因素有关。 根据km值可以推断酶和底物的亲和力。如果酶的专一性不高，可催化几种底物发生反应时，km值最小的就表示酶与这一底物的亲和力最大，反之，则最小。 ;酶催化的反应级数的讨论;双倒数图解法求方程参数;双倒数图解法（Lineweaver Burk图解） ;;影响酶催化作用的因素;酶浓度的影响;温度的影响;pH值的影响;抑制剂的影响;竞争性抑制;竞争性抑制主要特点;;??争性抑制图;非竞争抑制;;非竞争抑制图;非竞争性抑制与竞争性抑制的主要不同点;反竞争抑制;反竞争抑制图;例：水杨酸抑制谷氨酸脱氢酶催化的脱氢反应。试根据下列实验结果确定抑制类型Km和KI及值。又脱氢反应速度r的单位是根据340 nm波长下光吸收速率的增加来表示的。 谷氨酸脱氢酶的反应结果 ;;酶用于生物催化的概况;二．酶的组成和结构特点;3． 多酶复合体的组成部分;三．酶的作用机制 ;1． 酶的作用过程;2． 酶与底物的结合模型;a． 锁和钥匙模型;b ．诱导锲合模型;酶抑制作用的概念和分类;一 概念：能降低酶催化反应速度的因素 ;1. 失活作用;2. 抑制作用;3. 去激活作用;4. 阻遏作用;二．抑制程度的表示 ;二．抑制程度的表示;激活剂的影响;酶活力表示方法; 酶催化反应和化学催化反应的转换数大小的比较 ;酶的生产方法;发展趋势;发展趋势