第二章第六节消毒与灭菌ppt课件.pptVIP

第五节 消毒与灭菌检验医学院 杜季梅 物理消毒灭菌法 一、常用方法 1、热力法 2、辐射消毒 3、滤过除菌 4、超声波 5、干燥与低温抑菌 实验室生物危害废物示例 消毒学历史 1 、人类应用消毒学的手段、历史悠久： 公元前17世纪，《吕氏春秋》中有饮水需“九沸九度”之说 公元1578年《本草纲目》中“天气瘟疫，取出病人衣物，于甑上蒸过，则一家不染。”等。 公元前322年，希腊的亚里斯多德向亚历山大建议，让士兵饮用开水，掩埋粪便。 1485年，威尼斯用醋熏蒸消毒信件。 1804年，法国用热封装法保存食物。 2、消毒学的形成和发展 19世纪中叶随着微生物的发展，消毒工作才开始进入了有科学依据的时代，消毒技术上开始有较大的进步和发展。如压力蒸汽、干热、过滤等技术，漂白粉、石炭酸、升汞、甲醛等消毒药品的应用等。 基本概念 1、消毒（disinfection） 杀灭或去除物体上的病原微生物的方法。 用于消毒的化学物品称消毒剂。 2、灭菌（sterilization） 杀灭或去除物体上所有微生物的方法。包括繁殖体和芽孢，包括病原微生物和非病原微生物。 3、防腐（antisepsis） 破坏或抑制病原微生物的方法。用于防腐的化学物品称防腐剂。 4、无菌（asepsis） 没有活的微生物。包括繁殖体和芽孢，包括病原微生物和非病原微生物。 5、无菌操作（aseptic technique） 防止微生物进入无菌组织或物品的操作技术。 6、D值：能杀死微生物群中90%以上微生物所需接触热或化学物的时间或离子辐射剂量。 一、物理消毒灭菌方法 (一)机械除菌法:为了清除而不是杀灭，减少受感染的机会。 常用的方法有 1、打扫、擦拭 2、洗涤 3、通风 （二）温度 低温： 广泛用于保存菌种和标本。 高温：加热是最常用的清除病原体污染的物理手段。 热力灭菌主要是利用高温使菌体变性或凝固，酶失去活性，而使细菌死亡。 高温亦可导致胞膜功能损伤而使小分子物质以及降解的核糖体漏出。 1、热力消毒、灭菌法 （1）干热灭菌法 焚烧、灼烧、干烤、红外线烤箱 （2）湿热消毒、灭菌法 ①巴氏消毒法：71.7℃，15 ～30秒； 61.1℃～62.8℃ 30分 ②煮沸消毒法：一般细菌繁殖体煮沸5分杀死，芽孢需要1～2小时。 ③流通蒸汽消毒法：Arnold流通蒸汽灭菌器/蒸笼 巴氏消毒器（瞬时高温消毒器） ④间歇蒸汽灭菌法： 提供芽孢发育的条件，适用于不耐高于100 ℃的物品，如含血清的培养基等。 对某些物质，可将温度减低到75~80 ℃，每次加热时间延长到30~60分，次数增加到3次以上可达到灭菌目的。 ⑤高压蒸汽灭菌法： 原理： 在完全排除冷空气的密闭的容器中，蒸汽压力越大，温度越高，杀菌能力越强。 通常1.055kg/cm2或15磅的压力下，温度可达121.3 ℃，在此温度下维持15～30分，可杀死一切微生物。 高压蒸汽灭菌器（卧式） （1） 预真空式高压灭菌器 蒸汽进入前，灭菌器排出空气。 气体是通过一个装有HEPA过滤器的排气阀排出。 灭菌结束时，蒸汽自动排出。 高压灭菌可以在134℃进行，灭菌周期可以缩短至3min。 预真空式高压灭菌器对于多孔性物品的灭菌很理想，但由于要抽真空而不能用于液体的高压灭菌。 预真空式高压灭菌器（双门互锁） （2）重力置换式（“下排气式”）高压蒸汽灭菌器　 蒸汽在压力作用下进入灭菌器，由上而下置换较重（冷）的空气并通过灭菌器的排气阀排出。 （3）燃料加热压力锅式高压灭菌器 只有在没有重力置换式高压灭菌器的情况下才使用这一种灭菌器。 从其顶部装载物品，通过燃气、电力或其他燃料来加热。通过加热容器底部的水来产生蒸汽，由下而上置换空气并经排气孔排出。当所有的空气排出后，关闭排气孔的阀门，缓慢加热使压力和温度上升到安全阀预置的水平。 记时，灭菌结束后停止加热。温度下降到80℃以下再打开盖子。 燃料加热压力锅式高压灭菌器 （4）脉动真空蒸汽内循环高压灭菌器 脉动真空压力蒸汽灭菌器利用真空控制系统、经预抽真空及有限次脉动抽取，通过压力蒸汽循环，强制以饱和蒸汽替换残余空气，可将柜内冷空气抽除98％以上； 避免了因内部冷空气排除不彻底而存在的灭菌效果不稳定等问题。 灭菌后真空加温热烘干，可快速干燥灭菌物品。 脉动真空蒸汽内循环高压灭菌器 高压蒸汽灭菌器待灭菌物品放置 松散包装： 上下左右均应有空隙； 不能接触器壁； 物品应放在金属网状篮筐内或金属网架上； 物品装载量不超过总体积的80% 灭菌包内放置化学指示卡/条 高压蒸汽灭菌法适用范围：