端粒酶的结构与功能.docxVIP

端粒和端粒酶研究及应用黄品清要：端粒是真核生物染色体末端的一种特殊结构 ,由端粒DNA和端粒相关蛋白组成 ,它能维持染色体的结构稳定和功能 ,保护其免受核酸酶降解 ,防止其末端融合或重排等。当端粒长度因细胞复制而缩短到极限时，细胞就会走向衰老甚至死亡，而端粒酶的存在能补充已缩短的端粒从而延长细胞寿命甚至使其得到永生。端粒(telomere)是染色体末端的特殊结构，它的存在及其特殊构象的维持，是保护线性染色体末端、顺利完成DNA末端复制所必需的。端粒具有稳定染色体末端、解决末端复制不完整等多重功能。端粒酶(telomerase)是对抗正常复制过程中端粒的缩短、维持真核生物染色体长度的关键酶，在肿瘤细胞中表达尤为强烈。自“端粒缩短是触发细胞衰老的分子钟”的假说提出后，科学家们已通过实验提供了大量证据来证明该假说，随着对端粒和端粒酶的结构和功能研究的深入，它们成为国内外研究的热点之一。一、端粒的结构和功能端粒(telomere)是保护真核细胞染色体末端并维持其完整的特殊的DNA／蛋白质复合物，它像“帽子”一样扣在染色体的两端，从而维护染色体的完整性和稳定性，防止染色体被降解、融合和重组，便分裂后得到的子代细胞能准确的获得完整的遗传信息．1、端粒DNA的结构端粒DNA由两条长短不同的DNA链构成，一条富含G，另一条富含C。富含G的那条链5’一3’指向染色体末端，此链比富含Cc的链在其3’末端尾处可多出12～16个核苷酸的长度，即3’悬挂链(3’overhangstrand)，一定条件下能形成一个大的具有规律性很高的鸟嘌呤四联体结构，此结构是通过单链之间或单链内对应的G残基之间形成Hoogsteen碱基配对，从而使4段富含G的链旋聚成一段的四链体DNA。也有人认为，端粒G链序列可以形成稳定的发卡结构，它和四联体结构都被认为与端粒DNA的保护功能有关。不同物种端粒的重复序列和长度是不一样的，人类的端粒DNA由[5’一TTAGGG一3’]反复串联而成，不具有编码任何蛋白质功能，进化上高度保守，总长度约5一15kb，随着每次细胞分裂的进行，染色体末端丢失50一200bp。2、端粒结合蛋白的结构端粒结合蛋白包括端粒酶、保卫蛋白复合体(sheherin)和非保卫蛋白。保卫蛋白复合体由端粒重复序列结合因子l(TRFl)，端粒重复序列结合因子(TRF2)。端粒保卫蛋白1(P0rrl)，TRFl相互作用核蛋白(TIN2)，TIN2相互作用蛋白l(TINTl)及阻抑和活化蛋白1趣印1)组成，各分布在染色体端粒上，能保持端粒结构的相对稳定。非保卫蛋白有DNA修复蛋白RADSONBSl。胍E11，Ku86和DNAPKcs等，各分布不局限在端粒上。这三类端粒结合蛋白协同参与端粒动态平衡的维持和调节。3、D-loop—T-loop结构假说1999年Griffith等提出端粒结构的D-loop—T一100p假说。端粒的3’突出部侵入到端粒重复序列后形成T—loop，同时通过单链G尾的TTAGGG在环的端口内侧与CCCTAA碱基互补形成100～200碱基对的D-loop。T一100p的形成为端粒的保护作用提供了一个结构基础，并很好地解析了端粒对染色体的保护作用，因为端粒缩短到极限长度时已无法形成T-loop，使端粒失去了保护功能。染色体不能完整地复制导致细胞死亡。4、端粒与细脆衰老病关系的新假说2000年Blackbern提出了新的端粒与细胞衰老关系假说：端粒在正常的细胞分裂时能动态地从戴帽状态向非戴帽状态来回变换，处于前者时，细胞能继续分裂，处于后者则会引发细胞周期阻滞。当一定量的端粒因多次分裂而缩短到不能形成戴帽状态时，细胞将走向衰老甚至死亡。而激活端粒酶后。端粒便能以同源重组的式使非戴帽状态返回到戴帽状态，逃回过复制衰老而继续分裂。这个假说与端粒的D-loop—T-loop帽子结构可以说是相互呼应，因为T—100p的形成需要一定长度的端粒。从另一个角度说，端粒的进行性缩短使其难以恢复戴帽状态。由于3’悬挂末端的丢失会引起T-loop结构的破坏，导致端粒末端的非戴帽状态。因此，stemart等提出，3’悬挂末端的丢失才是触发复制衰老的信号，揭示了与衰老相关的端粒结构改变分子学机制。5、端粒在生物体中的功能目前认为端粒的主要功能包括：（1）保护染色体末端防止被核酶降解或被化学修饰或融合以及非正常重组，维持其完整性；（2）与其中蛋白质共同参与染色体的定位和复制，使细胞得以正常分化或繁殖；（3）反映细胞分裂的能力与寿命。事实证明，大多细胞的端粒长度与细胞的分裂能力有关，越长分裂能力越高，反之亦然。我们也能通过细胞的端粒长度和分裂一次端粒缩短的长度来估计细胞的寿命去挑选合适的细胞做相关的研究。二、端粒酶的结构和功能端粒酶于1984年由shpay等发现