2015年高考生物总复习配套选修1 专题12 传统发酵技术应用微生物培养与应用.ppt

(3)稀释涂布平板： ①稀释操作：每支试管及其中 9 mL 水、移液管均需灭菌； 操作时，试管口和移液管应在离火焰 1～2 cm 处。 ②涂布平板： a.涂布器用 70%酒精消毒，取出时多余酒精在烧杯中滴尽， 沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃后冷却。 b.不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，以免引燃 其中的酒精。 【典例】(2013 年新课标全国Ⅱ)临床使用抗生素前，有时 需要做细菌耐药实验。试验时，首先要从病人身上获取少量样 本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗 生素的敏感性。回答下列问题： (1)为了从样本中获取致病菌单菌落，可用____________法 或____________法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培 养、鉴别等步骤获得。 (2)取该单菌落适当稀释，用__________法接种于固体培养 基表面，而在 37 ℃培养箱中培养 24 h，使其均匀生长，布满平 板。 (3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有 A、 B、C、D 四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置， 培养一段时间后，含 A 的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病 菌对抗生素 A________；含 B 的滤纸片周围没有出现透明圈， 说明该病菌对抗生素 B________；含 C 的滤纸片周围的透明圈 比含 A 的小，说明_____________________________________； 含 D 的滤纸片周围的透明圈也比含 A 的小，且透明圈中出现了 一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素 D 的__________。 (4)根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选用抗生 素________。 [解析](1)在微生物的培养过程中，常用来分离微生物的方 法是稀释涂布法或平板划线法。(2)为了使微生物在培养基上能 够均匀的分布，一般用涂布法来将微生物接种在培养基上。(3) 在抗药性检验过程中，如果在菌落周围出现透明的圆圈，说明 此种抗生素可抑制该细菌；透明圈的大小表示着此种抗生素抗 菌的强弱。据此可判断抗菌强弱依次是 A、C、B；D 的透明 圈中出现了一个菌落，说明该菌落对此种抗生素具有耐药性。 [答案](1)划线 稀释涂布(或涂布) (2)涂布 不敏感 该致病菌对 C 的敏感性比对 A 的弱 耐 药菌 (3)敏感 (4)A 【举一反三 2】下面对发酵过程中灭菌的理解不正确的是 ( ) A.防止杂菌污染 B.消灭杂菌 C.培养基和发酵设备都必须灭菌 D.灭菌必须在接种前 [解析]灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。A 是灭菌的 目的，因为发酵所用的菌种大多是单一纯种，整个发酵过程不 能混入其他微生物(杂菌)；B 错误，因为灭菌的目的是防止杂菌 污染，但实际操作中不可能只消灭杂菌，而是消灭全部微生物。 C 正确，与发酵有关的所有设备和物质都要灭菌；发酵所用的 微生物是灭菌后专门接种的。D 正确，灭菌必须在接种前，如 果接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死。 [答案]B 微生物 的分离 分离分解尿素的细菌 分离分解纤维素的微生物 原理 提供有利于目的菌株生 长的条件(如营养、温度、 pH 等)，同时抑制其他微 生物的生长，常用选择 培养基筛选 刚果红可以与纤维素形成红色复合 物，当纤维素被纤维素酶分解后， 红色复合物无法形成，出现以纤维 素分解菌为中心的透明圈，我们可 以通过是否产生透明圈来筛选纤维 素分解菌 三、微生物的分离与计数 1.分离土壤中分解尿素的细菌与分离分解纤维素的微生物 的比较： 微生物 的分离 分离分解尿素的细菌 分离分解纤维素的微生物 过程 土壤取样→样品稀释→ 培养与观察 土壤取样→选择培养→梯度稀释→ 将样品涂布于含刚果红(CR)的鉴别 纤维素分解菌的培养基上→挑选产 生透明圈的菌落→发酵培养 鉴定 酚红指示剂(变红) 刚果红(产生透明圈) 培养基 固体培养基，尿素为唯 一氮源 选择培养基：液体，纤维素为唯一 碳源 鉴别培 养基 固体 液体 (续表) 2.统计菌落数目的方法： (1)稀释涂布平板法： ①原理：当样品的稀释浓度足够高时，培养基表面生长的 一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上 的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 ②操作： a.设置重复组，增强实验的说服力与准确性。 b.为了保证结果准确，一般选择菌落数在 30～300 的平板 进行计数。 ③计算公式：每克样品中的菌株数＝(C/V)×M，其中 C 代 表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V 代表涂布平板时