心肌肥厚的相关研究近况精要课件.ppt

心肌肥厚基础与临床 资料背景 随着人们饮食结构的改变，心血管疾病的发病率呈现逐年上升的趋势，以冠心病、重度心力衰竭为代表的心血管疾病已经成为致死的主要原因 现有研究已经公认： 心肌肥厚是心衰的前期病变．是心衰、脑卒中、冠心病、猝死等的独立危险因素。 病理性心肌肥厚能够导致心功能受损，是心力衰竭及心源性猝死的主要预测因子 。 定义 心肌肥厚是心脏对压力、容量超负荷等应激反应的一种长期、慢性的代偿机制，是由多种神经体液因素介导，体内多种细胞信息传导途径及基因表达参与调节的复杂病理生理过程。 通常所说的心肌肥厚指病理性心肌重构(remodeling)。 分类 病理表现 分子学水平 原癌基因（如c—jun，c—los，c—myc）的诱导表达，热休克蛋白基因HSP70的表达以及蛋白合成的增加，microRNA对靶基因调控作用的改变。 那么什么因素可以诱发心肌肥厚呢？ 心肌肥厚的刺激因素 临床诊断依据 实验方法———构建心肌肥厚动物模型 压力超负荷法——主动脉缩窄法 依据部位不同缩窄主动脉分为胸主动脉缩窄和腹主动脉缩窄 胸主动脉缩窄 由于要打开胸腔，需要准备动物呼吸机。胸主动脉缩窄法缩窄的部位可选择在升主动脉、主动脉弓。 腹主动脉法缩窄 王彦珍等对该方法进行了优化，相比传统切口手术创伤小，不易造成腹腔感染等，存活率达l00％。 压力超负荷法——主动脉缩窄法 该方法具有动物死亡率低、模型成功率高、可重复性好以及大鼠的心肌肥厚形成时间短等特点。是目前应用最广泛的制作心肌肥厚动物模型的方法。 动物模型构建成功后，有什么评定指标可以证实心肌肥厚模型构建成功呢？ 实验方法——评定指标 心肌组织总RNA的提取 RNA鉴定和定量 实验方法————分组处理 假手术组 心肌肥厚模型组 药物干预组 心肌肥厚机制的相关研究 Jak-STAT信号通路 低分子GTPases(Ras、RhoA和Racl) PKC信号通路 G蛋白家族G MAPK信号通路 Ca2+及其依赖的信号通路 wnt信号通路 AMPK miRNA 什么是miRNA miRNAs是近年来发现的一组高度保守的小的非编码RNA，大小约18～25个核苷酸，能在转录后调节基因表达。 绝大多数miRNAs基因在RNA聚合酶Ⅱ的作用下形成较长的茎环结构，称为初级miRNAs(primary miRNAs，pri—miRNAs) pri—miRNAs在Drosha—DGCR8复合物的作用下形成长度约60～70个核苷酸的发夹状RNA，称为前体miRNAs(precursor m iRNAs，pre—miRNAs)。 miRNA的主要调控方式 miRNAs复合体在解螺旋酶的作用下分离，其中一条链装配人RNA诱导的沉默复合体(RNA—induced silencing complex，RISC)，与靶mRNA的3’非翻译区(3 UTR)结合到位于胞浆的P body(processing body)中，通过抑制转录或降解mRNA来下调特定mRNA的蛋白表达 ：如果miRNAs与靶mRNA匹配完全，则该复合体降解靶mRNA；若两者序列部分匹配，尤其是miRNAs的5’端2～8个被称为种子序列(seed sequence)的核苷酸与靶mRNA 匹配完好，则通过抑制靶mRNA的翻译来沉默特定基因 miRNA的其他调控方式 此外，某些miRNAs，如miR16能够特异性地结合到某些基因3’UTR 的富含AU元件(AU—rich element，ARE)，指导Ago2等组成RISC的蛋白与三磷酸胸苷(TTP)结合，从而改变相应mRNA的半衰期，加速靶mRNA降解。 miRNAs主要是下调基因表达，但某些情况下，它们也可以通过负性调节抑制基因表达来增加目的基因的表达。 同样的miRNAs在不同的细胞类型或不同的疾病状态下可以调控不同的靶点 。 miRNA研究的生理学意义 早有研究证明，miRNAs参与了很多病理生理过程，如骨骼肌细胞的增殖与分化、造血干细胞的分化以及肿瘤的发生 。 生物信息学分析表明，每个miRNAs能够调节上百个不同的靶点，因此，miRNAs可能参与了所有的生理过程 。 miRNA研究的病理学意义 研究还表明，基因敲除体内在miRNAs成熟过程中必须的Dicer酶会导致小鼠发育停滞，敲除斑马鱼体内的Dicer酶会导致异常表型 。 小鼠Dicer酶敲除后心脏表型与临床上扩张型心肌病和心力衰竭患者的心脏表型很相似。 这证明在动物的发育及部分病理过程中miRNAs是必须的。 miRNA心肌肥厚 miRNAs的表达谱分析及通过动物模型对特定miRNAs的研究发现：miRNAs在心脏发育及病理状态下起着不同的作用。 对心肌肥厚动物模型miRNAs的表达谱变化已有多篇报