狂犬病疫苗质量评价唐建蓉课件.ppt

* 人用狂犬病疫苗质量评价及方法概述 唐建蓉 中国药品生物制品检定所 * 主要内容 人用狂犬病疫苗国内市场概况 质量标准对疫苗的安全与有效性评价 2010版药典对狂苗质量要求的突出点 疫苗上市前临床试验在质量评价中的作用 规模化生产的疫苗上市后质量评价 非标准检验方法在质量评价中的作用 继续性质量标准的研究工作 * 一. 人用狂犬病疫苗国内市场概况 生产企业： 两家国外企业: 深圳赛诺菲巴斯德生物制品有限公司 Chiron Behring Vaccines Private Ltd.(德国和印度) * 14家国内企业: 辽宁成大生物股份有限公司 (Vero细胞 ,生物反应器) 广州诺诚生物制品股份有限公司 (Vero细胞 ,生物反应器) 吉林迈丰生物药业有限公司 (Vero细胞 ,生物反应器) 辽宁依生生物制药有限公司 (Vero细胞 ,转瓶) 长春长生生物科技股份有限公司 (Vero细胞 ,转瓶) 江苏延申生物科技股份有限公司 (Vero细胞 ,转瓶) 宁波荣安生物药业有限公司 (Vero细胞 ,转瓶) * 武汉生物制品研究所 (Vero细胞 , 转瓶) 兰州生物制品研究所 (原代地鼠肾细胞 ,转瓶) 河南普新生物工程有限公司 (原代地鼠肾细胞 ,转瓶) 吉林亚泰生物药业股份有限公司 (原代地鼠肾细胞 ,转瓶) 大连汉信生物制药有限公司 (原代地鼠肾细胞 ,转瓶) 福尔生物制药有限公司 (原代地鼠肾细胞 ,转瓶) 大连金港安迪生物制品有限公司 (Vero细胞 ,转瓶) * 疫苗毒株和细胞基质： aG株 : 原代地鼠肾细胞或Vero细胞 CTN-1株 : Vero细胞 PV株 : Vero细胞 PM株 : 人二倍体细胞或Vero细胞 Flury-LEP株 : 鸡胚细胞 * 生产工艺：细胞工厂 (鸡胚细胞) 转瓶 (地鼠肾细胞或Vero细胞) 生物反应器 (Vero细胞 / 微载体) 剂 型： 液体或冻干 (0.5ml /剂，1ml/剂) 效 期: 液体苗1年效期 冻干苗有不同的批准效期 (1, 1.5或3年效期) * Vero细胞和原代细胞所产狂苗的变化趋势 2006年 2007年 2008年 * 国内狂苗生产企业逐年递增趋势 * 国产狂苗年批数和总量递增趋势 * 二. 质量标准对疫苗的安全与有效性评价 现行有关质量标准： WHO人用狂犬病疫苗规程 《中国药典》 2005年版三部 企业注册标准 YBS xxxxxxxx ...... * 主要的安全性评价指标： 病毒灭活验证 纯化原液蛋白质含量 牛血清白蛋白残留量 Vero细胞DNA残留量 无菌检查和异常毒性检查 细菌内毒素检查 硫柳汞含量和游离甲醛含量 * 有效性评价指标： 疫苗的效价测定与热稳定性试验 免疫后中和抗体检测 上述三种评价的互补与不足 * 三. 2010版药典对狂苗质量要求的突出点 抗生素的添加要求及检测 防腐剂的添加要求及检测 对疫苗生产细胞基质的宿主蛋白残留量检测 细菌内毒素尤其是Vero细胞DNA残留量 * 四. 疫苗上市前临床试验在质量评价中的作用 小量生产的精制疫苗 临床试验中的安全性监测 小鼠中和试验的血清学效果评价 快速荧光灶抑制试验(RFFIT)的血清学效果评价 * 五. 规模化生产的疫苗上市后质量评价 IV期临床试验 批签发制度 接种点对免疫后中和抗体的检测 国家管理当局定期监督检验 用户投诉 * 六. 非标准检验方法在质量评价中的作用 非标准方法的建立及标准化 ELISA鉴别检测 ELISA狂犬病毒抗原含量检测 电泳法检测非法添加核酸类物质 其它方法 * 对标准技术的补充作用 应用意义(完善产品质量、净化市场、行业违规查处) 非标准方法的应用实例 * ELISA法检测狂犬病毒抗原理图 * 对不同时期或不同温度条件下的狂犬病疫苗检测结果(cut off 0.23) 编号 贮存时间和温度 OD450nm 1 4°C，过效期0.5年 2.56 2 37°C，2周 2.73 3 56°C，2 月 2.71 4 - 20°C，7年