第六章 食物传播病原微生物检验1.doc

第六章 食物传播的病原微生物的检验 动物源性食品在加工、运输、储藏过程中，动物携带的病原微生物会传染给人类，从而引发感染，称食物感染。又称为肉源性食品感染，其中，人畜共患病原微生物在食物感染中占重要比重。 人、畜共患病是指脊椎动物与人类之间传播的感染疾病，即由共同病原引起、在流行病学上相互关联的人和脊椎动物的疾病。如：鼠疫、炭疽、霍乱等，主要传染源是鼠类、禽畜及其肉、蛋、乳产品等。 内容提要 炭疽杆菌及其检验 布氏杆菌及其检验禽流感病毒及其检验朊病毒及其检验 第一节 炭疽杆菌及其检验 炭疽(Anthrax) 一、生物学特性 一）形态特征 两端平直的革兰阳性大杆菌。 在体内细菌呈单个、成双或短链排列。有荚膜，不产生芽孢。 在体外细菌呈竹节状长链排列。无荚膜，产生芽孢。无鞭毛。 （二）培养特性 营养要求不高，在普通平板上生长良好，长成灰白色、表面粗糙的菌落，低倍镜下可见菌落边缘呈卷发状。 在血琼脂平板上的形态为：灰白色、半透明、中等大小，常不规则，玻璃样，周围无溶血环。 （三）抵抗力 炭疽杆菌对外界理化因素的抵抗力不强，但芽孢抵抗力很强，在干燥状态下可存活20~30年。 直接日光暴晒100h，煮沸40min，干热150℃ 60 min灭活，鬃毛上芽孢12l℃高压需15 min。 现场消毒常用20％漂白粉，2％～4％甲醛，0.5％过氧乙酸。 血清学特征 荚膜抗原：多肽，抑制调理作用，与其侵袭力有关，抗吞噬。 菌体抗原：无毒性，有种特异性。 保护性抗原：免疫原性。 芽孢抗原：免疫原性及血清学诊断价值。 （五）致病性 传染源：患病的牛、羊、骆驼等食草动物。 传染途径： 1、经皮肤粘膜：伤口直接接触病菌，若病菌毒力强可直接侵袭完整皮肤。 2、经呼吸道：吸入带炭疽芽孢的尘埃、飞沫等。 3、经消化道：摄入被污染的食物或饮用水等。进食染菌肉类。 致病物质 荚膜：抗吞噬作用，利于细菌繁殖; 炭疽毒素： 很强的外毒素，损伤微血管内皮细胞，感染性休克，死亡; 由Ⅰ因子：水肿因子（EF）、Ⅱ因子：保护性抗原(PA)、Ⅲ因子：致死因子(LF)组成的复合多聚体。 特点：单独注入均无毒性，保护性抗原+水肿因子或致死因子分别引起水肿、坏死或死亡。 生物导弹技术： 炭疽毒素+单克隆抗肿瘤抗体→肿瘤 致病机制 *炭疽杆菌芽孢 体内繁殖，产生外毒素 局部组织出血、坏死、水肿 荚膜抵抗吞噬细胞的吞噬作用 细菌扩散 邻近淋巴结炎、败血症 各组织器官炎症:血源性肺炎、脑膜炎等。 损伤微血管、内皮细胞 炭疽毒素 释放组织凝血活酶 弥漫性血管内凝血 （DIC） 微循环障碍、感染性休克 所致疾病 (占90%): 皮肤出现红斑、丘疹、水疱，周围组织肿胀及浸润，继而中央坏死形成溃疡性黑色焦痂，焦痂周围皮肤发红，肿胀，疼痛不显著。该部位附近的淋巴结肿大且常化脓，伴有发热、头痛、关节痛等。 (2%-3%） 高热，呼吸困难，可有胸痛及咳嗽，咳粘液血痰。肺部本症常只有散在的细湿罗音。X射线的主要表现为纵膈影增宽。常见胸腔积液。 ?? (3%-6%) ： 急性起病，发热，腹胀，剧烈疼痛，腹泻，通常为血样便或血水样便。可有恶心、呕吐，呕吐物中含血丝及胆汁。可累及消化道以外系统。 可继发于各型，也可能直接发生。剧烈头痛，呕吐，继而出现谵妄、昏迷、呼吸衰竭，脑脊液多为血性。 严重的全身中毒症状，高热、寒战，感染性休克与弥漫性血管内凝血表现，皮肤出现出血点或大片淤斑，腔道中出现活动性出血，迅速出现呼吸与循环衰竭。在循环血液中可检出大量炭疽芽孢杆菌。 三、炭疽杆菌的检验 １、采样 采集皮肤溃疡的渗出物、排泄物、血、胸腹水及脑脊液等标本。 采取标本时必须遵循的两条原则: 1)尽可能在抗生素治疗开始前采取标本。 2)除必要时并在具备操作病毒细菌条件的实验室内，不得用解剖的方式获取标本。所需血液与组织标本，均应以穿刺方式取得。 、显微镜检查 1）复合负染法 将标本或悬液滴在载玻片上，立即加等量的炭素墨水，混匀推片。待干燥后滴加95%乙醇数滴，干燥后再以1%结晶紫液染1min，用水冲洗，干后用油镜检查。如果发现在细菌与炭素颗粒之间存在明显的、连续的间隔带，即说明细菌的周围存在荚膜。 适用于液体标本（如血液、脑脊液）、悬液标本（如粪便或混有血液的土壤）。 2）荚膜染色法 将标本涂片或印片干燥，妥善包装后带入实验室，按常规方法固定：以美蓝染液染色3-5min，水洗、干后镜检。菌呈蓝色、荚膜