细胞生物学 - 动物染色体制备和观察.pptVIP

* * 动物染色体的制备和观察 目的要求 用品材料 实验内容 实验报告 复习预习 动物染色体的制备和观察 目的要求 掌握动物染色体的制备原理； 掌握空气干燥法制备染色体的过程。 动物染色体的制备和观察 用品材料 实验器材 水浴锅、离心机、显微镜、粗天平、解剖工具、吸管、 培养皿、离心管、记号笔、载玻片、试管架 实验试剂 Carnoy氏固定液(甲醇：冰醋酸=3:1,V/V，临用配制)、 低渗液 (0.075M KCl)、Giemsa染液(pH6.8) 实验动物 小鼠 动物染色体的制备和观察 实验内容 染色体作为遗传物质DNA的载体，只有在有丝分裂中期才能表现出典型形态便于观察和计数，所以一般采用特殊的技术方法，从有丝分裂的组织和细胞悬液中得到。最常用的方法是从骨髓细胞、外周血淋巴细胞和培养的细胞中制备。骨髓细胞数量多，细胞分裂旺盛，无需体外培养和无菌操作，便于取材，是最常用的实验材料。 秋水仙素处理 秋水仙素浓度：2?g/kg 作用时间：3～4h 收获细胞 取股骨 收集红骨髓 低渗处理 试 剂：0.075M KCl液 处理时间：～20min 动物细胞染色体制备和观察 预固定 新鲜Carnoy氏液 3-4滴，混匀 离心 粗天平配平 2000r/min，5min 弃上清，加5ml固 定液，固定10min 固定 离心 粗天平配平 2000r/min，5min 固定 弃上清，加5ml固 定液，固定10min 粗天平配平 2000r/min，5min 离心 高位滴片 空气干燥 染色观察 *