职业卫生和职业医学概论-氨基乙酰丙酸测定.pptVIP

一、原理 尿中δ-ALA与乙酰乙酸乙酯缩合生成吡啶化合 物。此化合物用乙酸乙酯萃取，与对－二甲氨基 苯甲醛反应生成红色化合物，在波长554nm处比色定量。  1.分光光度计2.水浴锅3.离心机 三、试剂 1. 去离子水2. 乙酸乙酯。3. 乙酰乙酸乙酯。4. 乙酸盐缓冲液(pH＝4.6) 5. δ-ALA标准溶液6. 显色剂 四、采样、运输和保存 用塑料瓶收集铅作业工人尿样50mL，尽快带回 实验室(夏季运输时最好冷藏)，测比重后，放4℃冰箱可保存二周。 五、实验步骤 六、计算 1.按式(1)计算尿样换算成标准比重(1.020)下的浓度的校正系数(k)。 七、注意事项 1.接触者的尿样采集时间不限,采样时应避免污染。 2.煮沸时间应从比色管放进水浴后,水重新沸腾, 开始计算时间，不得少于12min。 3.尿中δ-ALA含量高或颜色较深时,可减少取样量。 4.本法中红色生成物在60min内稳定。 5.乙酰乙酸乙酯如变黄色即不能使用 Company Logo LOGO 尿中δ-氨基乙酰丙酸的测定 预防医学实验教学中心 二、仪器 1.0 0 0 0 0 0 0 (3) 尿样，ml 2 2 2 2 2 2 2 (4) 缓冲液，ml 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 (5) 乙酰乙酸乙酯，ml ？ 10 7.0 5.0 3.0 1.0 0 δ－ALA含量，ug 1.0 1.0 1.3 1.5 1.7 1.9 2.0 (2) 水，ml 0 1.0 0.7 0.5 0.3 0.1 0 (1) 标准应用液，ml 6 5 4 3 2 1 0 离心管号 2.沸水浴12分钟，取出冷却至室温; 3.每管加乙酸乙酯 4ml,加塞振摇60-80次,离心5min; 4.各取2mL萃取层于另7支比色管中，各加2mL显色剂，混 匀，静置10min， 5.554nm处，以零管为参比，比色 6.以吸光度为纵坐标，δ－ALA含量为横坐标，作标准曲线； 7.从标准曲线上查出样品管中δ－ALA的含量 。 1. 2.按式(2)计算尿中δ－ALA的浓度。 式中： X——尿中δ－ALA的浓度，mg/L；m——样品管中δ－ALA含量，μg；V ——分析时所取尿样的体积，mL。 正常值：4mg/L Company Logo LOGO