基因克隆及功能分析PPT课件.pptVIP

转基因流程 转基因流程 转基因程序 正向遗传学 基因的图位克隆 图位克隆的基本原理 功能基因在基因组中都有相对较稳定的基因座，通过找到与目标性状紧密连锁的分子标记，在利用分子标记技术对目的基因精细定位的基础上，由于某一物种全基因组序列的公布，我们可以得到已定位区段的候选基因，通过对候选基因进行分析，确定目标基因，最后经遗传转化试验证实目的基因功能。 图位克隆的步骤： Primary mapping Fine mapping Candidate gene Complementation test Functional analysis 图位克隆能实现，关键在于全基因组（Col-0生态型）测序计划的完成和各种分子标记的发现。 Accession number, NCBI GI numbers, or sequence in FASTA format Bit分值：分值越 高，比对越好 E值：序列比对的统计学显著性指标。E值越低，则比对就更有可能具有显著性，即越相似。 Rapid Amplification of cDNA Ends (RACE) RACE 是采用PCR 技术由已知的部分cDNA 顺序来扩增出完整cDNA5’和3’末端,是一种简便而有效的方法, 又被称为锚定 PCR (anchored PCR)和单边PCR(one side PCR)。 3 RAC