细胞生物学第12章细胞增殖及其调控课件.ppt

第十二章 细胞增殖及其调控ChapterⅫ　Cell reproduction Cell Cycle Control 细胞增殖是生命的基本特征，种族的繁衍、个体的发育、机体的修复等都离不开细胞增殖。 细胞增殖（cell reproduction）：指亲代细胞(mother cell)经物质准备，分裂（cell division）产生子代细胞(daughter cell)的过程。 第一节 细胞周期概述 细胞周期是指细胞从一次分裂开始，到第二次分裂开始所经历的全过程。在这一过程中，细胞遗传物质复制，各种组分加倍，平均地分配到两个子细胞中去。 标准的细胞周期包括G1、S、G2和M四个时期。在一般的细胞中，S+G2+M的时间变化较小，G1时间差异较大。根据细胞的分裂增殖情况，可分为连续分裂细胞（周期中细胞）、休眠细胞（G0期细胞）及不分裂细胞（终端分化细胞）。 细胞周期的各时期 ①周期中细胞(cycling cell)：在细胞周期中连续运转细胞，如上皮细胞，通过持续不断的分裂以弥补死亡脱落造成的损失。 ②静止期细胞(quiescent cell)又称G0期细胞，细胞暂时离开细胞周期，停止分裂，一旦得到信号，会快速返回细胞周期分裂的细胞。如淋巴细胞、肝、肾细胞等。结缔组织中的成纤维细胞所在组织受到伤害回马上返回细胞周期，产生大量细胞于伤口部位，促使愈合。 ③终末分化细胞(terminal differentiation cell)：不可逆地脱离细胞周期，不再分裂的细胞，又称终端细胞，如神经、肌肉、多形核细胞等等。 二、细胞周期时相及其主要事件 （一）G1期 细胞进入G1期后，即开始为下一次分裂做准备，该期的特征：（1）物质代谢活跃，主要是合成蛋白质、RNA和酶类，测定发现各种与DNA复制有关的酶，RNA在G1期明显增多；（2）细胞体积增大，线粒体、叶绿体、核糖体明显增多，内质网更新扩大，高尔基体、溶酶体数目增加；（3）中心粒开始复制。动物细胞中，2个中心粒彼此分离，开始复制。 在G1期的检验点 (G1 checkpoint)又称限制点 restriction ,R点：DNA是否损伤？细胞外环境是否适宜？细胞体积是否足够大？。在芽殖酵母中称为起始点Start。 （二）S期 S期的主要是进行DNA的合成及染色质包装。（1）进行DNA的复制合成，该期核中每条染色质细丝会复制出一条相同的染色质细丝；（2）组蛋白合成，染色质包装成核小体。 S期检验点：DNA复制是否完成？ （三）G2期 （1）染色质开始螺旋化并缩短；（2）中心粒复制完成，成为二对；（3）微管蛋白合成完成，微管蛋白在S期开始合成，G2期完成。 G2/M检验点：DNA是否损伤？细胞体积是否足够大？ （四）M期 M期又称D期(mitosis or division)，细胞分裂开始到结束。真核细胞的细胞分裂主要包括有丝分裂和减数分裂。 中-后期检验点：纺锤体组装检验点。 细胞周期检验点小结 细胞周期中的三个主要关卡（检验点） 在每一个关卡，由细胞所处的状态和环境决定细胞能否通过此关卡,进入下一个阶段。 1. G1期的检验点（G1 checkpoint，又称限制点 restriction ,R点）：影响G1期的检验点信息主要是DNA是否损伤、细胞外环境是否适宜、细胞体积是否足够大。 2. G2/M检验点：影响G2/M检验点的因素主要是DNA是否正确复制和是否复制完全、细胞是否生长得足够大。 3. 中-后期检验点（纺锤体组装检验点）：影响中-后期检验点的主要信息是染色体是否完全分离。 其他一些事件影响细胞周期的正常进行，如射线或化学因素引起的DNA损伤、未复制的DNA等。 三、细胞周期长短测定（Mensurate the Cell cycle） （一）脉冲标记DNA复制和细胞分裂指数观察测定法 1、脉冲标记DNA复制和细胞分裂指数观察测定法是最经典的测定细胞周期各时相时间的方法，利用3H-TdR（胸腺嘧啶核苷）掺入DNA和放射自显影技术。 2、适用于细胞类群相对简单，细胞周期时间相对较短，周期运转均匀的细胞群体。 3、基本原理：用3H-TdR给待测细胞以脉冲标记（即给动物一次3H-TdR 注射，或加3H-TdR于细胞培养液中短暂培养然后洗脱），使在该段时间内已处于S期不同阶段的全部细胞其DNA被3H标记，而处于其它时相的细胞则不被标记。随后，每隔一定时间取样做细胞放射自显影，找出正处于有丝分裂的细胞，计算其中带3H标记的细胞占有丝分裂细胞的百分数，绘制曲线即可测得各时相持续时间。 4、脉冲标记DNA复制和细胞分裂指数观察测定法测定细胞周期的过程 （1）经3H-TdR 脉冲标记后，S期的细胞DNA具3H