结核病实验室检查及EQA培训资料课件.ppt

结核病实验室检查 目录 《中国结核病防治规划实施工作指南》2008版 新指南中对结核病实验室的要求 结核病实验室检查要求 分枝杆菌分离培养 痰涂片检查的登记报告 痰涂片镜检标准化操作及质量保证手册 痰涂片镜检标准化操作 痰涂片镜检质量保证 生物安全 《中国结核病防治规划实施工作指南》2008版 DOTS策略 对所有肺结核病症状可疑者使用痰涂片检查,发现传染性肺结核病人。 我国结核病控制策略二 提高发现和治疗肺结核患者工作质量 加强实验室能力建设 实验室的建设，改善各级结核病实验室工作条件 开展培养和药敏试验 质量控制 技术指导 研究能力 生物安全管理和感染控制 《中国结核病防治规划实施工作指南》2008版 各级实验室的职责 省级参比实验室 实施和推广国家结核病实验室诊断标准和操作规程，对结核病实验室工作进行技术指导、评价；制定培训计划，开展相关培训； 地市级实验室 实施和推广国家结核病实验室诊断标准和操作规程；制定培训计划，开展相关培训； 县级实验室 开展痰涂片检查工作，根据当地实际情况逐步开展结核分枝杆菌的分离培养； 乡镇卫生院（社区卫生服务中心） 开展痰涂片检查工作 实验室的建设 房屋设置 实验室：各级根据工作需要，保证实验室用房达到生物安全标准。 结核病细菌学实验室布局原则 结核病细菌学检查要有独立的实验室，不得与其他实验室混用。 培养基制备、洗刷等相对洁净的操作与涂片镜检、培养前处理、药敏试验等污染操作要有独立分开的场所，最好分别在专用的房间进行。 实验室生物安全（略） 结核病实验室检查要求 痰盒 统一使用螺旋盖、可密封、广口的塑料痰盒收集痰标本。 医务人员在容器上应注明患者姓名、编号（门诊序号或登记号）、检查项目、痰标本序号1、2、3（1为即时痰，2为夜间痰，3为次日晨痰） 标本采集 痰标本 即时痰 晨痰 夜间痰 痰采集方法宣教 患者留取的痰标本，应由检验人员或经培训的专人目视检查标本质量（特别是用于初次诊断的痰标本）。标本量一般在3～5 ml。 留痰场所 由于患者咳嗽、咳痰时，易产生含有结核菌的飞沫，感染周边人群的机率较高，故采集痰标本时应在远离人群的开放空间进行，或在通风良好的室内进行。 痰标本性状 标本性状按照国家实验室质量控制新标准，分为干酪痰（A）、血痰（B）、粘液痰（C）和唾液（D） 合格的痰标本一般为干酪痰、褐色血痰或含少量新鲜血液的血痰、粘液痰。痰标本不合格时，应进一步指导并要求患者重新送检。 直接痰涂片检查 检查对象 确定诊断，发现传染源； 肺结核患者、疑似肺结核患者和肺结核可疑症状者 疗效评价，作为确定化疗方案和治疗效果评价的指标。 已确诊、登记和治疗的肺结核患者 直接痰涂片检查 痰涂片的制备 为了保证检验人员的安全，严禁在涂抹痰标本的同时，对载玻片进行加热 。 涂抹完毕后的痰标本，在结果报告前应暂时保留。 萋尔－尼尔逊染色法（Ziehl-Neelson） 镜检 由于香柏油能够溶解复红染料，使萋尼氏染色褪色，并且容易干燥凝结，对油镜头造成损害；故应该使用专门用于100×油镜、不干燥、不变硬且粘度适宜的镜油。 结果报告 萋尼氏染色镜检结果分级报告标准 抗酸杆菌阴性：连续观察300个不同视野，未发现抗酸杆菌。 报告抗酸杆菌菌数：1～8条抗酸杆菌/300视野。 抗酸杆菌阳性（1＋）：3～9条抗酸杆菌/100视野。 抗酸杆菌阳性（2＋）：1～9条抗酸杆菌/10视野。 抗酸杆菌阳性（3＋）：1～9条抗酸杆菌/每视野。 抗酸杆菌阳性（4＋）：≥10条抗酸杆菌/每视野。 报告“1+”时至少观察300个视野，报告“2+”时至省观察100个视野，报告“3+”、“4+”时至少观察50个视野。 玻片的保存 萋尼氏染色玻片阅读完毕后，应及时使用擦镜纸揭取数次，彻底去除玻片上的镜油。 经脱油、干燥后的玻片，按实验室序号及涂片编号放置在玻片盒中，存放在阴凉干燥的环境中，以备复检或质控抽检。 荧光染色的玻片，玻片盒中放置干燥剂后密封放置在4℃冰箱保存。 荧光染色涂片质控时，应首先将复检涂片进行萋尼氏染色后，重新阅读。 分枝杆菌培养 分枝杆菌培养主要用于确定诊断、耐药监测和药物敏感性试验。 确定诊断 临床表现或胸部X线检查怀疑肺结核，但直接涂片检查结果为阴性的患者，可以进行培养检查以进一步明确诊断。确定诊断的培养检查应采集2个合格的痰标本，即“夜间痰”和“晨痰”送检。 耐药监测 耐药监测的培养是以获得分枝杆菌纯培养物用于药敏试验为目的，故一般选择涂片检查阳性患者的标本进行培养。患者用于涂片的3份痰标本中选择2份做培养： 3份痰标本均为阳性：选取阳性级别高的2份痰标本进行培养； 3份痰标本2份阳性：选取2份阳性痰标本进行培养； 3份痰标本1份阳性：