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试验侵袭性真菌病的辅助诊断方法课件
* * 目前G试验中?葡聚糖采用的单位为重量单位“pg”。pg是一个非常非常微量的单位。因此G试验是一项非常灵敏的生物检测。当然,越是灵敏精确的检测,越容易受到干扰。 目前?葡聚糖没有公认的标准物质! 没有国际标准品,没有国家标准品,也没有公认的行业标准品,只有企业的标准品(质控品) * * 各企业的?葡聚糖标准品的来源不一。有的来自茯苓多糖,有的来自香菇多糖,有的来自海藻多糖。不同来源的?葡聚糖对鲎试剂的活性不同。 各企业的?葡聚糖标准品效价不一。你的1pg可能相当我的10pg。相互之间无可比性。 * * 无统一的标准品导致不同厂家试剂盒有不同的参考值。有的是?10pg为阳性,有的是?100pg为阳性。 对参考值的表示各厂家也有所不同。有的以全血含量来表示,有的以检测浓度来表示。 * * 1.2 试验器具对G试验有重要的影响! ?葡聚糖是自然界广泛存在的一种物质,极容易污染到试验器具。 ?葡聚糖是一种非常稳定的物质,通常的蒸煮高压、辐照等灭菌手段不能彻底破坏?葡聚糖。很难找到真正意义的无?葡聚糖的器具。 * * G试验使用到的实验器具: 采血针 采血管(瓶) 反应试管 移液器具(吸头) 最主要的污染来自采血管! * * 重要建议 最好使用厂家供应的专用采血管(瓶) 其次是用经厂家检测合格的采血管 不能使用未经检测的实验器具 * * 尊重科学,为患者负责! 无效试验是对患者最大的危害! * * 2.试剂的生物特异性 如前所述,G试验的检测试验就是鲎试剂。鲎试剂可以对两种物质反应,用于不同的用途。如下图表示。 检测内毒素/脂多糖 用于革兰氏阴性菌检测鲎试剂 检测?葡聚糖(G试验) 用于真菌检测 * * 在检测试剂制备上,应根据试剂的用途制备生物特异性强的检测试剂,如: 用于检测细菌脂多糖的试剂,不能对?葡聚糖产生反应。 用于检测真菌?葡聚糖的试剂,不能对脂多糖产生反应。 * * 遗憾的是,由于技术的原因,并不是所有厂家的试剂都具有生物特异性。 有的试剂盒对LPS和?-G都反应。 有的试剂盒对非检测对象低浓度时可能不反应,较高浓度时会反应。 无生物特异性的试剂盒不能区分细菌感染和真菌感染,不具有临床检测价值! * * 3. 某些药物对G试验的影响 3.1 临床应用发现,注射过香菇多糖注射液的供试者作G试验,其血液中?葡聚糖含量会显著增高。因此需要作G试验的供试者应在24小时内避免使用香菇多糖注射液。 * * 3.2 临床应用发现,使用过脂肪乳的供试者作G试验(包括作LPS检测),反应曲线形态会发生异常,致使检测值非常高。因此需要作G试验的供试者应在24小时内避免使用脂肪乳。 * * ?-G检测的正常反应曲线 * * 100 pg/mL 500 pg/mL 5000 pg/mL 正常人 3.3 正常反应曲线与异常反应曲线的比较 ?-G检测的异常反应曲线 * * 61000 pg/mL 达限时间250″ LPS检测的正常反应曲线 * * 0.05EU/mL 0.25EU/mL 2.5 EU/mL 正常人 LPS检测的异常反应曲线 * * 医学上通常把用于检测真菌?葡聚糖的鲎试验称为G试验。这是取葡聚糖的英文名称Glucan的首字母来命名该试验。 * * 需要指出的是,隐球菌的细胞壁虽然有?葡聚糖组分,在隐球菌感染患者的血液中却检测不出?葡聚糖异常。这可能与隐球菌具有特殊的细胞被膜有关。因此G试验不适合对隐球菌感染的检测。 * * 四、G试验——临床意义 * G试验的临床意义 * G试验的临床意义 * * * G试验应用科室 * 五、“生物探针”介绍 * “生物探针”介绍 * “生物探针”介绍 * “生物探针”介绍 * “生物探针”介绍 * “生物探针”功能 快速定量的临床检测方法,帮助临床医生早期诊断目前常规方法难以判断的侵袭性真菌感染、革兰氏阴性菌感染,便于对感染的早期诊断、早期治疗及对治疗的疗效判定。 可检测标本 : 血浆、血清、尿液、腹水、脑脊液等 * 六、“生物探针”操作流程 * “生物探针”操作流程 * “生物探针”操作流程 * “生物探针”操作流程 * “生物探针”操作流程 * “生物探针”操作流程 * “生物探针”操作流程 * “生物探针”操作流程 * “生物探针”操作流程 数据可接入LIS系统等 * 侵袭性真菌感染的临床检测方法对比 方法 特点 传统 检查 直接培养真菌法 敏感性低,耗时长, 培养阳性率低。培养结果是定性的,有些标本采集困难 辅助方法:临床表现,免疫学,病理学,影像学检查等。 观察期不确定,费时费力,特征性不明
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