HPLC法对蒙药四味土木香散中氧化苦参碱含量测定分析.docVIP

HPLC法对蒙药四味土木香散中氧化苦参碱含量测定分析 　　[摘要] 目的 探讨临床中采取高效液相色谱法（HPLC）测定蒙药四味土木香散中氧化苦参碱含量的准确性和临床意义。 方法 将选取的蒙药四味土木香散标本采取HPLC法测定其氧化苦参碱的含量。色谱柱：Shim-pack CLC-ODS色谱柱（6.0 mm×150 mm，5 μm）；流动相：0.05 mol/L磷酸二氢钠溶液-甲醇-高氯酸钠（750∶250∶20）；流速：1.0 mL/min；波长：215 nm；温度：室温。 结果 通过检测分析，氧化苦参碱在0.2～1.6 μg的范围内和峰面积的线性关系良好，而且平均加样回收率达到了99.6%，RSD = 0.5%。 结论 临床中对于测定蒙药四味土木香散中氧化苦参碱含量采取HPLC法具有较好的应用效果，而且这种方法操作简单，准确性高，值得在临床中推广与应用。 　　[关键词] 蒙药四味土木香散；氧化苦参碱；HPLC法 　　[中图分类号] R927 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）05（c）-0144-03 　　蒙药四味土木香散是临床中常见的一种药物，主要由土木香和苦参以及珍珠杆与山柰等药物精制而成的，临床上具有清热解表的效果。但是，在对其进行质量控制时，如何采取有效的方法进行测定显得尤为重要。临床中采取测定的方法也比较多，常见的采取高效液相色谱法（HPLC）测定苦参碱的含量，但是这种测定方法中被测峰面积比较小，而且存在拖尾和保留时间长等不足[1]。随着人们对其质量控制的不断研究，有资料采取HPLC法进行测定其中的氧化苦参碱，且具有较好的应用效果。因此，本文对这种测定方法进行深入的探讨，具体的方法如下： 　　1 材料与方法 　　1.1 研究材料 　　仪器：岛津LC-6A液相色谱仪和CR-3A记录仪以及SPD-6AV检测器与SIL自动进样器。 　　试剂：甲醇作为色谱纯，其他的试剂为分析纯。氧化苦参碱对照品（由中国药品生物制品检定所提供），蒙药四味土木香散（由内蒙古蒙药股份有限公司提供）。 　　1.2 方法 　　本次研究对于测定蒙药四味土木香散中的氧化苦参碱含量采取HPLC法进行测定，条件如下[2]：色谱柱：Shim-pack CLC-ODS色谱柱（6.0 mm×150 mm，5 μm）；流动相：0.05 mol/L磷酸二氢钠溶液-甲醇-高氯酸钠（750∶250∶20）；流速：1.0 mL/min；波长：215 nm；温度???室温。 　　2 结果 　　2.1 系统适用性试验 　　通过上述的条件下分析，选取供试品和对照品以及阴性空白样品溶液均取20 μL。结果显示，供试品溶液的色谱被测峰和其他的峰分离较好，而且理论塔板数均按照氧化苦参碱峰计算4000[3]。具体的图像显示见图1。 　　2.2 溶液制备 　　取样品溶液0.5 g，并采取精密进行称定，然后将其进行置入锥形瓶中，并进行滴加0.5 mL的浓氨试液，精密加入20 mL的三氯甲烷，并对其质量进行称定，采取超声进行处理40 min，并放冷，再次称定其质量。然后，加入三氯甲烷补足原来的质量，经虑过和精密量取后，取续滤液5.0 mL，并进行蒸干处理，在残渣中加入无水乙醇溶液进行稀释并进行摇匀。最后采取微孔膜进行过滤，所得的溶液即为供试品溶液；然后依据处方的比例进行制备缺苦参阴性样品溶液，并采取同样的方法制备阴性对照品溶液。同时，精密称取氧化苦参碱对照品，并利用甲醇制成0.198 mg/mL的溶液作为对照品溶液[4]。 　　2.3 线性关系 　　本次研究对于线性关系的考察如下：精密称取对照品溶液1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 mL，并将抽取的溶液置入25 mL的量瓶之中，加入流动相稀释到刻度，并摇匀处理。然后按照上述的色谱条件进行测定峰面积，其中，纵坐标为峰面积的积分值，横坐标为进样量[5]。并绘制标准的曲线图，得出回归性方程：Y=1 118 990X+13 871，r = 0.9999。其中，线性范围值为0.2～1.6 μg。 　　2.4 精密度试验 　　首先，精密量取2.0 mL的对照品溶液，并将其置入25.0 mL的量瓶之中，并采取流动相进行稀释到刻度，进行摇匀，重复进样5次，每次进行测定20 μL，得峰面积积分值的RSD = 0.3%。然后，采取同样的方法量取2.0 mL的供试品溶液，并将其置入25.0 mL的量瓶之中，并采取流动相进行稀释到刻度，进行摇匀，重复进样5次，每次进行测定20 μL，得峰面积积分值的RSD = 0.8%。 　　2.5 稳定性试验 　　称取同一批的供试品溶液，并且进行分别在2、4、6、8 h时进行进样1次，而且每次进样为20 μL，并详细记录峰面积积分值，其结果显示