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内源性神经干细胞原位激活与微环境 　　[摘要]　研究显示，神经损伤可激活内源性神经干细胞（NSC）增殖、分化和迁移。内源性NSC的原位激活受其微环境中各种信号分子的调控。Wnt、Notch　和bHLH信号途径对NSC的激活有着重要的作用。促有丝分裂因子、神经营养素可促进NSC的增殖、分化，中药、针灸亦有一定的促进作用。本文对神经干细胞的生物学特性及微环境的影响加以阐述。 　　[关键词]　内源性神经干细胞；原位激活；微环境 　　[中图分类号]　R318 [文献标识码]　A [文章编号]　1673-7210（2012）12（a）-0039-03 　　神经再生研究给神经科疑难病的治疗带来了新的机遇。基于神经干细胞的治疗策略可分为两类，一是原位激活内源性的神经干细胞或前体细胞达到神经再生的目的，二是将体外扩增的神经干细胞或前体细胞植入到受损的中枢神经系统，即细胞替代治疗。神经干细胞的增殖、分化及迁移受内因（基因调??）和外因（细胞微环境）的共同影响。本文主要阐述内源性神经干细胞的原位激活及其诱导微环境，为神经干细胞应用于临床提供理论依据。 　　1　内源性神经干细胞的特性 　　1.1　内源性神经干细胞的存在部位 　　大量研究证实，成体神经系统内存在神经干细胞，这些来源于受体自身的干细胞称为内源性干细胞。在许多成年哺乳动物的海马齿状回的颗粒下层和侧脑室的室下区，始终存在神经发生。这些神经前体细胞可增殖、分化并整合入神经回路[1-2]。 　　1.2　内源性神经干细胞标记蛋白 　　神经发生可分为增殖、迁移和分化三个阶段。增生的早期标志物主要有5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷（5-bromo-2-deoxyuridine，5-BrdU）、Nestin　等。BrdU是一种胸腺脱氧核苷类似物，当细胞处于DNA合成期而同时又有BrdU存在时，就会有BrdU掺入新合成的DNA中，因而视为细胞增殖的标志。Nestin是神经上皮前体细胞中的一种中间丝蛋白，属于细胞骨架的一种，其表达始于神经胚形成时，用于标记早期原始神经细胞。与神经元前体细胞的迁移相关的标志物主要有多聚唾液酸神经细胞黏附因子（polysialylated　neural　cell　adhesion　molecule，PSA-NCAM）、Doublecortin（DCX）等。PSA-NCAM的表达与神经元的迁移和神经元回路的形成有关，以介导细胞间的黏附和识别，可作为神经可塑性的标志物；DCX内存在进化保守的重复序列，构成微管结合域，以维持微管的稳定性，可用来研究神经元前体细胞的增殖和迁移。NeuN是一种神经元特异性核蛋白，是成熟神经元标志物。GFAP是星形胶质细胞的标志物，常用于鉴别神经元分化类型。 　　2　内源性神经干细胞与微环境 　　干细胞在机体组织中的居所可称为干细胞巢（stem　cell　niche）。微环境（microenvironment）的概念是Schofield于1978年首次提出的，指细胞生长发育赖以生存的环境，由基质细胞、细胞外基质以及各种调控因子等共同构成。 　　2.1　内源性神经干细胞与信号转导 　　信号转导就是各类信号通过细胞膜或细胞内信使分子引起细胞基因表达改变的过程。Wnt、Notch　和bHLH信号途径对神经干细胞的激活有着重要的作用。 　　才礼扬等[3]研究大鼠脊髓损伤后Wnt-3a信号蛋白表达及其对脊髓神经干细胞增殖的影响，　发现大鼠损伤后脊髓中央管周围和外周软膜即有BrdU阳性细胞和Wnt-3a表达明显高于对照组，且Wnt-3a表达与Brdu表达具有相关性，因此推测内源性神经干细胞的增殖可能与Wnt信号转导通路的激活和Wnt-3a表达有关。 　　隋毓秀等[4]应用　BrdU　观察慢性氟西汀干预对正常大鼠海马齿状回神经再生的影响，发现氟西汀干预下海马　BrdU　阳性细胞进行性增加，Notch　信号各因子基因表达均显著增高，提示　Notch　参与了氟西汀调节海马齿状回神经再生的上调。 　　bHLH　转录因子是一类重要的增强子和启动子　DNA的结合蛋白。研究发现，bHLH　转录调控因子　Hes-1受　Notch　受体信号调节系统的调节，，在神经系统的发育过程中，Hes1广泛地表达于成年小鼠脑中，Brdu阳性细胞几乎全部表达Hes1，Hes1参与了神经干细胞分化和增殖的调控，对保持神经干细胞的数量、调控其分化至关重要[5]。 　　2.2　内源性神经干细胞与促细胞分裂因子类 　　神经干细胞在体内的分化过程均受到局部环境中各种信号分子的作用。多种细胞因子可以参与调解细胞分化。 　　成纤维细胞生长因子（fibroblast　growth　factor，FGF）是目前研究较为透彻的细胞因子之一。Yoshimura等[6]证实，在大鼠MCAO