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一、填空题1． 基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。2． 基因工程的两个基本特点是： (1)____________，(2)___________。3． 基因克隆中三个基本要点是：___________；_________和__________。4． 通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小 的片段，可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的___________。5． 限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的，第一个大写字母取自_______，第二、三两个字母取自_________，第四个字母则用___________表示。6．部分酶切可采取的措施有：(1)____________(2)___________ (3)___________等。7．第一个分离的限制性内切核酸酶是___________；而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是_____________。8．限制性内切核酸酶BsuRI和Hae的来源不同，但识别的序列都是_________，它们属于_____________。9．DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_____________切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段，具有两种酶活性： (1)____________； (2)________________的活性。10．为了防止DNA的自身环化，可用_____________去双链DNA__________________。11．EGTA是____________离子螯合剂。12．测序酶是修饰了的T7 DNA聚合酶，它只有_____________酶的活性，而没有_______酶的活性。13．切口移位(nick translation)法标记DNA的基本原理在于利用_________的_______和______的作用。14．欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式，通常可采用_________或_______________。15．反转录酶除了催化DNA的合成外，还具有____________的作用，可以将DNA-RNA杂种双链中的___________水解掉。16．基因工程中有3种主要类型的载体： _______________、_____________、______________。17．就克隆一个基因(DN***段)来说，最简单的质粒载体也必需包括三个部分：_______________、_____________、______________。另外，一个理想的质粒载体必须具有低分子量。 18． 一个带有质粒的细菌在有EB的培养液中培养一段时间后，一部分细胞中已测不出质粒，这种现象叫 。19． pBR322是一种改造型的质粒，它的复制子来源于 ，它的四环素抗性基 因来自于 ，它的氨苄青霉素抗性基因来自于 。20．YAC的最大容载能力是 ，BAC载体的最大容载能力是 。21．pSCl01是一种 复制的质粒。22．pUCl8质粒是目前使用较为广泛的载体。pUC系列的载体是通过 和 两种质粒改造而来。它的复制子来自 ，Amp抗性基因则是来自 。23．噬菌体之所以被选为基因工程载体，主要有两方面的原因：一是 ； 二是 。24． 野生型的M13不适合用作基因工程载体，主要原因是 和 。25． 黏粒(cosmid)是质粒—噬菌体杂合载体，它的复制子来自 、COS位点序列来自 ，最大的克隆片段达到 kb。26． 野生型的l噬菌体DNA不宜作为基因工程载体，原因是：(1) (2) (3) 。27．噬菌粒是由质粒和噬菌体DNA共同构成的，其中来自质粒的主要结构是 ，而来自噬菌体的主要结构是 。28．l噬菌体载体由于受到包装的限制，插入外源DN***段后，总的长度应在噬菌体基因组的 的范围内。29． 在分离DNA时要使用金属离子螯合剂，如EDTA和柠檬酸钠等，其目的是 。30． 用乙醇沉淀DNA时，通常要在DNA溶液中加人单价的阳离子，如NaCl和NaAc，其目的是 。31． 引物在基因工程中至少有4个方面的用途：(1) (2) (3) (4) 。32．Clark发现用Taq DNA聚合酶得到的PCR反应产物不是平末端，而是有一个突出碱基末端的双链DNA分子。根据这一发现设计了克隆PCR产物的 。33．在cDNA的合成中要用到S1核酸酶，其作用是切除在 。34．乙醇沉淀DNA的原理是 。35． 假定克隆一个编码某种蛋白质的基因，必须考虑其表达的三个基本条件：(1)________________________________ (2)____________