饮料、茶叶及相关制品中二氟尼柳等18种化合物的测定（BJS 201714）.docVIP

附件2 饮料、茶叶及相关制品中二氟尼柳等 18种化合物的测定 BJS 201714 范围 本方法规定了饮料、茶叶及相关制品中二氟尼柳等18种抗风湿类化合物的液相色谱-串联质谱测定方法。 本方法适用于饮料、茶叶及相关制品中二氟尼柳等18种抗风湿类化合物的测定，其他基质可参照本方法定性检测。 原理 试样经甲醇水溶液提取，稀释后采用液相色谱-串联质谱仪检测，外标法定量。 试剂和材料 除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为 GB/T 6682 规定的一级水。 试剂 乙腈（CH3CN）：色谱纯。 甲醇（CH3OH）：色谱纯。 甲酸（HCOOH）：色谱纯。 乙酸铵（CH3COONH4）：优级纯或相当者。 溶液配制 含0.05 %甲酸的2 mmol/L乙酸铵溶液：称取0.154 g乙酸铵（3.1.4），加入适量水溶解, 再加入0.5 mL甲酸（3.1.3），用水定容至1000mL。 甲醇水溶液（4+1）：准确量取400 mL甲醇（3.1.2）和100 mL水，混匀后备用。 标准品 二氟尼柳、美洛昔康、舒林酸、吡罗昔康、醋氯芬酸、贝诺酯、依托考昔、萘普生、芬布芬、奥沙普秦、尼美舒利、氟比洛芬、双氯芬酸钠、依托度酸、吲哚美辛、萘丁美酮、非普拉宗、塞来昔布标准品的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量详见附录A中的表A.1，各标准品纯度均≥95%。 标准溶液的配制 标准储备液(500 μg/mL)：准确称取各标准品（3.3）50.0 mg（精确至0.0001 g），分别置于100 mL容量瓶中，美洛昔康加5mL水溶解，再用甲醇（3.1.2）稀释至刻度，其余标准品用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，配制成浓度各为500 μg /mL标准储备液，-20保存，有效期3个月。 混合标准中间液A（1 μg/mL）：分别准确吸取0.2 mL美洛昔康、舒林酸、吡罗昔康、贝诺酯、依托考昔、奥沙普秦、双氯芬酸钠、依托度酸、非普拉宗各标准储备溶液（3.4.1），置于同一100 mL容量瓶中，用甲醇（3.1.2）稀释至刻度，摇匀，配制成浓度为1 μg/mL的混合标准中间液A，-20保存，有效期1个月。 混合标准中间液B（5 μg/mL）：分别准确吸取1.0 mL二氟尼柳、醋氯芬酸、萘普生、芬布芬、尼美舒利、氟比洛芬、吲哚美辛、萘丁美酮、塞来昔布各标准储备溶液（3.4.1），置于同一100 mL容量瓶中，用甲醇（3.1.2）稀释至刻度，摇匀，配制成浓度为5 μg/mL的混合标准中间液B，-20 保存，有效期1个月。 混合标准系列工作溶液：分别准确吸取混合标准中间液A和B适量，置于同一容量瓶中，用甲醇（3.1.2）稀释配制成系列标准工作溶液S1~S5。混合标准中间液A（3.4.2）中各化合物浓度为2ng/mL、4ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL、40 ng/mL；混合标准中间液B（3.4.3）中各化合物浓度为10 ng/mL、20 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL、200ng/mL；临用新制或依仪器响应情况配制适当浓度的混合标准工作溶液。 微孔滤膜：0.22 μm，有机相。 仪器和设备 高效液相色谱-串联质谱仪，配有电喷雾离子源（ESI源）。 粉碎机。 电子天平：感量分别为0.0001 g和0.01 g。 超声波水浴。 试样制备 饮料 充分混匀，直接取用。 茶叶及相关制品 取适量有代表性的试样，粉碎机粉碎后过40目筛，装入洁净容器中，密封并标记。 分析步骤 样品提取 饮料 准确称取1 g（精确至0.01 g）试样置于50 mL容量瓶中，加入20 mL甲醇-水溶液（4+1）（3.2.2），摇匀（固体饮料需充分溶解），再用甲醇-水溶液（4+1）（3.2.2）定容至刻度，混匀，经 0.22 μm滤膜过滤，取滤液，根据实际浓度适当的稀释至工作曲线线性范围内，供高效液相色谱-串联质谱测定。 茶叶及相关制品 准确称取1 g（精确至0.01 g）试样置于25 mL容量瓶中，加入20 mL甲醇-水溶液（4+1）（3.2.2），摇匀，超声30 min，冷却至室温后，用甲醇-水溶液（4+1）（3.2.2）定容至刻度，混匀静置10 min，准确吸取2 mL上清液至10 mL容量瓶中，用甲醇-水溶液（4+1）（3.2.2）定容至刻度，混匀，经 0.22 μm滤膜过滤，取滤液，根据实际浓度适当的稀释至工作曲线线性范围内，供高效液相色谱-串联质谱测定。 测定 仪器参考条件 液相色谱条件 a) 色谱柱：C18柱，100 mm× 2.1 mm，粒径 2.2 μm，或性能相当者。 b) 流动相：A为乙腈（3.1.1），B为含0.05 %甲酸的2 mmol/L乙酸铵溶液（3.2.1），梯度洗脱程序见表1。 c) 流速：0.3 mL/min。 d) 柱温：35 。