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管理精品细菌的染色和细菌细胞构造的观察课件
细菌的染色和细菌细胞构造的观察 细菌的染色和细菌细胞构造的观察 目的要求 染色剂和染色的原理 实验材料 实验程序 思考题 目的要求 学习微生物涂片 掌握细菌的一般染色发和革兰氏染色 进一步熟练掌握显微镜油镜的使用技术 观察和识别细菌细胞的特殊构造 染色剂和染色原理Ⅰ 微生物染色的基本原理,是借助物理和化学因素的作用而进行的。物理因素如:细胞及细胞物质对染料的毛细现象、渗透、吸附作用等。 化学因素如:正负离子之间的相互吸引等 染色剂 染料按其电离后所带电荷的性质可分为以下类型: 1. 酸性染料:如酸性复红、刚果红、伊红、藻红、苯胺黑等。 2. 碱性染料:一般有碱性复红、中性红、孔雀绿、番红、结晶紫、美兰、甲基紫等,细菌易被碱性染料染色。 3. 中性(复合)染料:如伊红、美兰等,Wright染料和Gimsa染料等(常用于细胞核染色)。 4. 单纯染色:这类染料的化学亲和力低,大多是偶氮化合物,不溶于水,但溶于脂肪溶剂中,如苏丹类(Sudan b)的染料。 染色剂和染色原理Ⅱ 微生物染色常用染料如下表: 实验材料 涂片染色用的细菌培养物 1.大肠杆菌(Escherichia coli) 24h的斜面培养物。 2.枯草杆菌(Bacillus subtilis) 12—16h的斜面培养物。 载玻片、接种环、镊子、酒精灯、各种染色液、火柴、无菌牙签、玻璃铅笔、蒸馏水。 显微镜、镜头油、擦镜纸、吸水纸、二甲苯等。 示范片 1.苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)的芽孢; 2.胶质芽孢杆菌(Bacillus mucillaginosus)的荚膜; 3.枯草芽孢杆菌的鞭毛。 实验程序Ⅰ (细菌染色的方法和步骤) 细菌染色的方法: 1.单染色法:用一种染色液染菌体后,就可以观察微生物的大小、形状、和细胞排列状况,但不能鉴别微生物以及它的特殊构造等。 2.复染色法:用两种或两种以上染色液进行染色,有协助鉴别微生物的作用,故也称鉴别染色法。常用的有:革兰氏染色法、抗酸染色法、芽孢染色法、芽孢染色法、鞭毛染色法、细胞染色法等。 染色技术的一般过程 涂片 干燥 固定 染色 媒染 脱色 复染 水洗 干燥 镜检 实验程序Ⅱ (简单染色的方法和步骤) 简单染色法(一般染色法) 1.菌种:牙垢细菌 2.涂片 3.干燥:自然气干或酒精灯高处微微加热。 4 固定
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