真核生物录的调节控制生物化学与分子生物学教案.doc

第三节 真核生物转录的调节控制 1．顺式作用元件： 指可影响自身基因表达活性的DNA序列，包括：核心启动子，如 TATA 框；上游启动子，如 CAAT框,GC框；远上游顺序，如增强子，衰减子、 静息子，酵母的UAS（upstream activator sequences 上游激活剂序列）等；特殊细胞中的启动子成分，如淋巴细胞中的Oct（octamer）和κB。 2．反式作用因子：主要为蛋白质 转录调节因子由某一基因表达后，通过与特异的顺式作用元件相互作用（DNA-蛋白质相互作用），或通过与其它调节因子的相互作用（蛋白质-蛋白质相互作用），反式激活另一基因的转录，可以分为3类； 通用反式作用因子，主要识别启动子的核心启动成分，如TBP； 特殊细胞的反式作用因子，如淋巴细胞中的Oct-2； 同反应性元件（response elenents）结合的反式作用因子，如HSE（热休克反应元件，heat shock response element），GRE（糖皮质激素反应元件glucocorticoid response element）；MRE（金属反应元件，metal response element）；TRE（肿瘤诱导剂反应元件，tumorgenic agent response element）相应的反式作用因子。 3．几种真核生物promoter的结构 真核生物的promoter与增强子的距离和方向差别很大，转录因子与增强子结合促进其与promoter靠近，并促进基因的表达。 金属硫蛋白的promoter由多个元件构成，特异应答元件如MREs（金属应答元件）和GRE（糖皮质激素应答元件）。BLEs元件（基础水平元件）与基础表达（组成性表达）有关，TRE是一个肿瘤应答元件，可以被促肿瘤佛波脂如TPA（tetradecanoyl phorbol acetate,四癸基佛波乙酸脂）活化。AP为反式作用因子。 增强子通过蛋白质介导与promoter相互作用，形成的DNA环使增强子结合的特异转录因子与同promoter结合的转录因子及RNA聚合酶Ⅱ相互作用。转录因子与RNA聚合酶Ⅱ的蛋白质：蛋白质相互作用活化基因的转录。 4．DNA结合蛋白基序的结构 （1）螺旋-转角-螺旋基序二聚体与DNA的二重对称位点结合，辨认螺旋（红色）与DNA的大沟结合，另一个螺旋（紫色）帮助辨认螺旋锁定在特定的位置。 几种蛋白质中的螺旋-转角-螺旋基序 蛋白质与DNA的双位点相互作用 （2）Zn-指C2H2基序与DNA的相互作用。3个Zn-指基序与DNA半个螺旋的大沟结合，Zn-指的螺旋指向大沟，与大沟的碱基对相互作用。 Zn-指基序 二级结构 Cx家族Zn-指蛋白质的特征 （3）亮氨酸拉链C/EBP*的C-末端螺旋结构，Leu处于螺旋的一侧。 即CCAAT and Enhancer Binding Protein，从小鼠肝脏提取的一种耐热的DNA结合蛋白。 雌激素受体的DNA结合结构域与DNA辨认元件的相互作用。 11种特异性结合蛋白碱性区和亮氨酸拉链区序列的比较 亮氨酸拉链二聚体bZIP蛋白质的结构 bZIP蛋白质杂二聚体转录因子c-Fos:c-Jun结合于DNA的AP-1共有靶序列TGACTCA 三、转录的抑制剂 1．嘌呤和嘧啶的类似物：如6-巯基嘌呤在体内可以转变为巯基嘌呤核苷酸，阻断嘌呤核苷酸的生物合成，从而抑制转录。5-氟尿嘧啶是尿嘧啶的类似物，可以掺入RNA，5-氯，5-溴，5-碘尿嘧啶是胸腺嘧啶的类似物，可以掺入DNA，并可以引起碱基配对的错误。上述化合物可作为抗癌药使用。 2．DNA模般功能的抑制剂：烷化剂可以使DNA烷基化，通常有致癌作用；放线菌素D可以插入碱基平面之间，抑制转录作用，色霉素A，橄榄霉素，光神酶素有类似的作用；嵌入染料如丫啶和菲锭可以使DNA发生移码突变，抑制复制和转录。 3．RNA聚合酶的抑制剂：利福霉素（或利福平），利链霉素可以和原核生物RNA聚合酶的β亚基结合，抑制转录，α-鹅膏蕈碱可以抑制真核生物的转录。 利福霉素和利福平:转录起始的抑制剂 蛹虫草菌素：转录起始的抑制剂 α-鹅膏蕈碱是真核生物转录的抑制剂