百合的组织培养技术综述.docVIP

百合的组织培养综述 （辛文龙，200674010152） 摘要 对百合的分布和组织培养的进展状况及组织培养在百合育种中的应用作了综述。特别罗列了百合组织培养中所选用的外植体类型和一些组培材料的最佳分化、生根培养基配方；阐述了组织培养中常见的一些问题；并介绍了百合组织培养在其育种中的应用。 关键词 百合；组织培养； 百合(Lilium.spp.)是百合科(Iiliaccae)百合属(Lilium)多年生草本植物。我国是百合植物的原产地，早在1400多年以前就有人工栽培，食用、观赏和药用百合的栽培利用历史十分悠久。百合除具有观赏价值外，大多数可以食用、药用，是上等的滋补佳品。传统的白合繁殖方法主要采用常规分球、分珠芽鳞片扦插、鳞片包埋等。但采用这些方法繁殖，繁殖系数较小，特别是经多代分殖以后，常造成种性退化，甚至病毒积累，影响百合的产量和质量。利用组织培养技术，能够迅速去除病毒和更新品种，加快了百合的快速繁殖速度，缩短了百合的生育周期。在百合杂交育种中也存在着基因库贫乏、种间杂交不亲和等局限性，而组织培养中的胚培养、花药培养等技术则可克服这些弊端。现将目前百合组织培养及育种方法做简单总结。 1百合的分布 全世界百合约有90多个种，主要分布在北半球的温带和寒带地区，少数种类分布在热带高海拔地区，南半球没有野生种分布。中国是百合种类分布最多的国家，也是世界百合起源的中心。据调查，中国约有47个种18个变种，占世界百合总数的一半以上，其中有36个种15个变种为中国特有种；日本有15个种，其中9个种为日本特有种；韩国有11个种，其中3个为特有种；亚洲其他国家和欧洲共有约22个种；北美洲约有14个种。 2百合的组织培养外植体类型 2.1外植体的选择 2.1.1鳞片 百合鳞片作为外植体具有容易获得、分化能力强、对培养基要求不严等优点是目前百合组织培养中普遍采用的外植体。主要是通过调节生长素和细分裂素的比例来诱导其组织产生不定芽和再生植株。研究表明，百合鳞片不同部位的分化能力是有差别的,有实验表明,鳞片上部几乎不能形成小鳞芽，中部形成能力较弱，下部与鳞茎盘相连的部位形成小鳞芽的能力最强。 2.1.2叶片 叶片是百合组织培养的另一重要外植体。采用鳞片作为外植体可能会造成百合野生资源的破坏，而采用百合叶片不会影响百合的正常生长，可有效利用百合野生资源。另外，百合叶片比鳞片更易产生愈伤组织。 陆春霞[3]等研究不同激素配比对百合叶片诱导与分化的影响，结果表明：2，-4D能诱导愈伤组织的形成。 2.1.3茎段 采用百合茎段进行组织培养。陈小兰等[4]用金百合(L . trompeten)带腋芽的幼嫩茎段诱导产生小鳞茎。 2.1.4珠芽 百合属植物由地上茎叶腋生长出的气生小鳞茎称珠芽。百合在栽培过程中往往出现退化现象，而病毒感染是造成退化的主要原因，通过珠芽培养可有效进行百合脱毒、复壮。王红霞等[5]( 2000)以通江白合( L . sargentiae)幼嫩珠芽为外植体诱导产生出丛生芽。 2.2外植体消毒 常用的药剂有乙醇、升汞、次氯酸钠及漂白粉等。通常都是用乙醇对材料进行预灭菌，使用浓度一般为70%～75%，灭菌时间为10～ 60 s。升汞的使用浓度为0. 1%～0. 2%，灭菌时间为10 min左右；用浓度为20. 0g/L的次氯酸钠溶液浸泡10 min，灭菌时要不断摇动；漂白粉的使用浓度为饱和溶液，灭菌时间为10～ 20 min。材料灭菌后再用尤菌水冲洗5次左右。 3百合的离体快繁 3. 1激素对百合组织培养的影响 激索种类和激索浓度显著影响百合属植物组织培养的成败。在百合组织培养中主要是通过调节生长素和细胞分裂素的比例来控制百合外植体的形态发生。在诱导形成小鳞茎的过程中主要采用NAA , BA激素，也有采用IBA 、 KT、2,4- D等激素的。以下罗列了一些百合组织培养基的配方，见表1。 3 .2培养基类型对百合组织培养的影响 分析MS、1/2MS N6这3 种培养基的各种离子浓度， MS 的总离子浓(94.06mM)和总氮浓度(60.03 mM)最高；N6 77.4 mM 和35.00 mM；1/2MS (48.16 mM) 和(30.01 mM)。由于不同植物外植体茎的分化要求不同的培养基离子浓度， 。. 3继代次数对分化能力的影响 在龙牙百合再生获得的小鳞茎上切取小鳞片转到M S+ 0. 1 mg/ L KT+ 0. 15 mg/L NAA的继代培养基上进行继代培养，每50 d转移1次，每次切取上一代的小鳞片进行培养，发现继代2~ 3次时，分化率最高达91%，以后随着继代次数的增加，分化率开始下降，继代到第6次时，分化率为26%。杜捷等[