工学微生物12革兰阳性需氧和兼性厌氧杆菌自制课件.ppt

第十二 章 本章内容 革兰阳性无芽胞杆菌 白喉棒状杆菌 产单核细胞李斯特菌 红斑丹毒丝菌 革兰阳性需氧芽胞杆菌属 炭疽芽胞杆菌 蜡样芽胞杆菌 教学要求 掌握白喉棒状杆菌、炭疽芽孢杆菌生物学性状与微生物学检验。 熟悉产单核细胞李斯特菌的生物学性状与微生物学检查法。 了解红斑丹毒丝菌、蜡样芽胞杆菌的生物学性状与微生物学检查 第一节 革兰阳性无芽胞杆菌 （一 ）生物学特性 1. 形态结构：革兰氏染色阳性，菌体细长弯曲，一端或两端膨大呈棒状，常排列呈V、L等文字形。无鞭毛、无荚膜、无芽胞。用亚甲蓝或奈瑟染色，菌体一端、两端或中央可见明显的浓染颗粒，称为异染颗粒，主要成分是核糖核酸和多磷酸盐。 电镜下的白喉杆菌 革兰染色白喉棒状杆菌 血平板上菌落 亚碲酸钾血平板菌落： 3. 生化反应 发酵葡萄糖、麦芽糖，产酸不产气。 触酶和硝酸盐还原试验阳性，氧化酶阴性。 不分解尿素，不产生吲哚。 4. 抵抗力 对热抵抗力强，煮沸1分钟死亡。对干燥、寒冷和日光的抵抗力较其他无芽胞细菌强，对一般消毒剂敏感。 （二）微生物学检验 标本的采集 鉴定 直接涂片 分离培养 毒力试验 2. 鉴定 直接涂片染色镜检 革兰染色：观察形态、染色 异染颗粒染色：观察异染颗粒 初步报告：检出具有异染颗粒的革兰阳性杆菌 分离培养：同时接种血平板及吕氏斜面或亚碲酸钾血平板 吕氏斜面：生长迅速，涂片镜检异染颗粒明显 亚碲酸钾血平板：黑色菌落 鉴定要点 革兰阳性，着色不均匀，菌体细长弯曲，排列不规则，有X、V形态，具有异染颗粒 触酶阳性，无动力，无芽胞 吕氏血清斜面的菌落：灰白色、隆起、湿润 亚碲酸钾血平板的菌落：黑色或灰黑色 毒力试验 人类临床标本中检出白喉棒状杆菌，并非都能产生毒素，产生外毒素的菌株是由于携带β-棒状杆菌噬菌体。可用 Elek 琼脂扩散法体外试验或用动物体内毒力测定。 (1)琼脂平板毒力试验： 将含有20％牛血清肉汤琼脂注于平皿中，将浸有lOOu／ml抗毒素血清的滤纸条沉于琼脂内，在与滤纸条垂直方向将待检菌划线接种，同时接种标准产毒株作为阳性对照。37℃培养 24—48h，若菌苔两侧出现斜向外侧延伸的乳白色沉淀线，并与其邻近的标准产毒株的沉淀线相吻合，则为产毒株。 (2)动物试验 采用家兔皮内试验法。取待检菌的48h肉汤培养液O．2ml，注射在去毛的一侧体壁皮内，5h后注射500U白喉抗毒素血清，30min后再次注射同样的培养液于动物去毛的另一侧体壁皮内作为对照。经24—72h后，若注射抗毒素前接种培养液的部位发生红肿与坏死，而对照部位不发生任何变化，则说明待检菌株具有毒力。 （三）临床意义 传染源：患者或带菌者 致病物质：白喉外毒素（由携带β-棒状杆菌噬菌体的白喉杆菌产生） 经呼吸道飞沫感染，引起白喉。 假膜脱落阻塞呼吸道是白喉早期死亡的主要原因 中毒性心肌炎是白喉晚期死亡的主要原因 抗白喉免疫主要依靠白喉抗毒素的中和作用 二、产单核细胞李斯特菌 （一）生物学特性 （二）微生物检验 （三）临床意义 （一）微生物特性 形态与染色：G+短小杆菌或球杆菌，常成双排列，无芽胞 培养特性：最适30～37℃， 4℃能生长，在血琼脂平板上，形成较小、圆形、光滑而有狭窄β-溶血环的菌落，耐8.5%NaCl，半固体培养中动力阳性（倒伞形，是本菌特征之一）。 生化反应：触酶（+），甲基红（+），VP（+）， CAMP（+），发酵葡萄糖、果糖、麦芽糖等，产酸不产气 （二）微生物学检验 标本采集：血液、脑脊液、分泌物及病变组织等 鉴定： 直接涂片：脑脊液离心后取沉淀涂片，其它直接涂片 分离培养： 脑脊液：血琼脂平板 血标本：增菌后，再接种血琼脂平板 咽拭子、组织和粪便等：接种于肉汤培养基中，置于4℃冰箱中冷增菌，然后转种于血琼脂平板 （二）微生物学检验 鉴定特点：G+杆菌，细菌在湿片中呈翻筋斗运动，触酶阳性等 （三）临床意义 李斯特菌属有7个种，只有该菌对人和动物致病 分布广泛，土壤、水、植物、人和动物粪便中均存在，亦可自甲壳动物、蝇、蜱中分离出 能引起多种野生动物和家畜感染（羊、马、狗、猫、鸟、鱼等） 正常人粪便带菌率达10%左右，70%的人可短期带菌。新生儿、免疫功能降低者，易受该菌感染 第二节 革兰阳性需氧芽胞杆菌属 炭疽芽胞杆菌 蜡样芽胞杆菌 炭疽病疫情 据新华社电2011年8月?12日，从辽宁省卫生厅获悉，辽宁鞍山海城市和岫岩县近日发生的皮肤炭疽传染病疫情，截至11日20时病例报告数已增至30例，其中临床确诊病例3例，疑似病例27例，无死亡病例。 据调查，辽宁这次疫情是由于当地居民私自屠宰或接触病牛而感染发生的 皮肤炭疽 一、炭疽芽胞杆菌 炭疽芽胞杆菌是人类历史上最早被发现的病原菌，俗称炭疽杆菌。是一种致病能力最强的革兰阳