年禽流感核酸检测考核结果汇报课件.ppt

* 此图是黑龙江的结果，当7号被H9N2的N2引物扩出时他们就把7号定位在了禽流感范围内，其实是一个H3N2的标本，他们并没有想到还可能是H3N2去做H3N2的鉴定，最后上报结果为AN2。 * 左图为上海结果，季节性流感引物M引物； 右图为河南结果，禽流感M引物；下图为湖北，左为季节性流感M引物，右为禽流感M引物。 绝大多数省份的结果和湖北类似。在应急任务中使用禽流感M引物。 FluA-M-F65 FluA-M-R400 M 336bp FluA-M-F173 FluA-M-R382 AM 209bp 2008年更新M引物 FluA-M-F30 FluA-M-R264 均可以监测出 avian and seasonal influenza virus。 * 思路为一个号一个号来做，每个号做9对引物。这样的思路没有问题，但这样实际操作时无法用对照来质控，所以这样做的省份实验体系中都没有对照。 * 每对引物做10个样品。 * 此图是逐步筛选的，这个思路也没问题，但对于这次考核来说还是存在漏筛的可能 这个图5号和14号只用季节流感M和B来筛是阴性其他没有做，这样判定的阴性结果理由不够充分。 * 从图上看9号12号为弱阳，从提交的结果上看他们被定义为了阴性。 * 8号是阳性他们判定正确，但不应该这么弱。从Marker不清来看很有可能是电泳的原因。 * * 此图若Y轴设置为对数就会显示正常的曲线。 * 此图低下黑线为阳性对照，棕色线为标本H5N1 10-2稀释。 此图基线不稳机器状态不好，黑线和棕色线信号太低，梯度也不够好。 问题：低浓度模板CT值有可能在40左右，Realtime存在模板浓度太低时结果不好判定的缺点。 * 2007年10月16日至11月16日期间，国家流感中心对全国31个省级CDC进行了禽流感核酸检测能力的考核，在标本下发的同时对各省级CDC实验室相关信息进行了问卷调查，截至到2007年11月16日，共收到30个省级CDC（97％，除西藏）返回的调查结果。该问卷采用选择题的形式，共18题，通过对如下5个方面的调查，对各省级CDC实验室相关情况进行了解： * * * * * 1.各省级CDC PCR仪器配置情况 仪器设备非常好 上海市、浙江省、广东省（PCR仪三台，Real-time PCR仪两台） 仪器设备较好 黑龙江、安徽、江西、甘肃、宁夏回族自治区（两种类型的PCR仪各有两台) 仪器设备充足 具备PCR仪、Real-time PCR各一台 仪器名称 N 0台 1台 2台 3台 n ％ n ％ n ％ n ％ 常规PCR仪 Realtime PCR仪 30 30 1 0 3.3 0 10 17 33.3 56.7 16 13 53.3 43.3 3 0 10 0 表1 各省级CDC PCR仪配置情况 2.各省级CDC常用试剂及耗材供应商情况 流感中心推荐使用的试剂和耗材 常用试剂（Takara） Promega、Qiagen（常用） Roche、Sigma的试剂（发达省份） 供应商名称 N n % Roche Qiagen Sigma Invitrogen Promega 其它 30 30 30 30 30 30 6 30 6 4 14 8 20 100 60 13.3 46.7 26.7 表2各省级CDC常用试剂及耗材供应商情况 供应商名称 N n ％ Axygen Griener Costar 其它 30 30 30 30 28 6 9 4 93.3 20 30 13.3 表3各省级CDC常用耗材供应商情况 3.个人防护设备 各省级CDC个人防护设备基本齐全 个别省级CDC缺少个别防护设备 如 有的CDC缺少N95口罩，有些省缺少面罩。 个人防护设备 N n ％ 连体防护服 护目镜 面罩 防护鞋套 N95口罩 30 30 30 30 30 30 29 25 30 29 100 96.7 83.3 100 96.7 表4 各省级CDC个人防护设备 4.检测标本的内容及检测方法的应用 辽宁、上海、山东、湖南4个省级CDC除了对人类标本样品进行流感病毒检测之外，还对动物来源的样品进行检测。 通过对各省级CDC禽流感检测方法应用的调查可以反映出各省级CDC日常检测工作的内容。广西壮族自治区CDC日常工作的内容仅为快速流感检测，而河北、上海、浙江、河南、广东5个省级CDC除了调查表中提到的4个检测方法的应用外，还分别进行不同类别的检测，如爆发疫情的检测、人流感病毒亚型的鉴别、呼吸道病毒鉴别诊断、不明原因肺炎病例检测、环境标本检测。 检测内容/检测方法的应用 N n ％ 检测内容 -检测人类标本 -检测动物标本 检测方法应用 -禽流感疑似病例标本检测