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 现代病理学技术概况 主讲人：周晓龙 讲课时间：2016年1月6号 病理学的定义 Pathology 是病痛（ pathos）的研究(logos) 联系基础医学与临床医学的桥梁 研究疾病状态下细胞、组织和器官结构和功能的改变 通过各种手段解释疾病，为临床诊断，治疗和疾病的预防提供依据 病理学技术 病理学包括病理学理论和病理学技术。病理学技术是“病理学之母”。病理学的理论和技术被视为一辆车的两个轮子，缺一不可，互为依存，互相促进，两者的结合决定着病理学的发展。 病理学技术包括尸体解剖、大体标本的制作、制片（石腊切片、冰冻切片、半薄切片、超薄切片等）、组织化学方法，免疫组化技术、原位杂交、分子病理技术、电镜技术、图像分析等。 病理技术的发展促进了病理学理论的进步。 病理学的发展 器官病理学时代： Giovanni Battista Morgagni （1682 ,1 –1771,11） 意大利解剖学家 现代解剖病理学之父 编写《疾病的位置与原因》，包含646例解剖记录 奠定了病理学发展的基础 遗憾：没有将病理与临床联系 病理学的发展 组织病理学时代 Rudolf Virchow （1821,10-1902,12) 德国医生 现代病理学之父 编著《细胞病理学》 开创了细胞病理学时代 病理学的发展 现代病理学时代(近400年历史） 电子显微镜：细胞超微结构的观察 免疫病理学：免疫组化技术的应用 分子病理学：疾病遗传和基因的研究 数字病理学： 病理学技术 传统病理学技术 HE染色技术 组织化学染色 细胞病理学技术 现代病理学技术 超微病理 免疫病理 分子病理 数字化病理 传统病理学技术 病理学技术的基础和根本，是临床和科研最常用的技术 全手工操作发展为自动化的机器：脱水机，包埋机，封片机，染色机，包埋盒和切片打号机，液基细胞制片技术 材料的优化：塑料包埋盒，一次性切片刀 试剂的该进：试剂的商业化，非污染环保试剂 低温恒冷切片机替代二氧化碳制冷机等 现代病理学技术 免疫组织化学技术：发展快，应用广，已成为临床诊断，靶向药物的筛选以及科研的重要手段；尽管存在问题。 电镜技术：包括透射电镜，扫描电镜，免疫电镜等，用于肿瘤的分型，肾脏病的诊断，肌肉疾病的诊断等；科研。 分子病理技术：近20年来发展最快，分子生物学技术与病理形态结合，用于疾病诊断和分类，靶向药物的筛选，病原体的检测，遗传学研究等。 数字化病理：病理切片扫描技术，远程会诊，图像分析系统，档案的数字化管理。 病理技术的进步促使人类的认识从大体、细胞、超微结构、分子基因水平逐步深入。 免疫组化(pubmed检索） 应用免疫学（抗原抗体反应）和组织化学（化学反应）的原理，对组织切片或细胞标本中的某些成份进行原位定性、定位甚至定量研究的技术。 现代病理学技术 免疫组织化学技术的应用： 临床诊断和鉴别诊断 肿瘤的分型 肿瘤起源的判断 靶向药物的筛选 肿瘤生物学行为的判断 病原体的检测 ……? 分子病理(pubmed检索） 现代病理学技术 分子病理学技术： FISH PCR 原位杂交 基因测序 分子病理学技术的应用 诊断与鉴别诊断 肿瘤预后判断 药物的筛选 ……. 分子病理在临床中的应用 肺非小细胞癌EGFR突变的检测：EGFR突变阳性者应用络氨酸激酶药物（易瑞沙）有效，否则效果不佳 血尿的诊断：检测9号，3号，17号，7号染色体可以辅助膀胱癌的诊断和预测术后复发的可能 C-kit突变的检测：C-kit突变可用于选择是否使用药物”格列卫“ 大肠癌k-ras基因检测：ras基因突变对西妥昔单抗治疗无效，患者预后差。 淋巴瘤的分型：应用FISH检测可辅助淋巴瘤的分型，为临床治疗提供依据。 ….. 电子显微镜技术 电子显微镜，包括透射电镜和扫描电镜 电镜技术包括负染色技术、冷冻蚀刻技术、电镜细胞化学技术、电镜X射线显微分析技术、电镜放射自显影技术等 主要用于肾小球肾炎的分型 确定肿瘤细胞的组织发生、类型和分化程度 扫描电镜能够直接观察样品的表面的结构，血管腔面改变 共聚焦激光扫描显微镜 （confocal laser scanning microscopy） 利用计算机及图像处理系统对组织，细胞及亚细胞结构进行断层扫描，再现三维立体空间结构，将形态学研究从平面图像水平提高到三维立体水平；在观察培养细胞形态结构的同时，直接显示培养活体细胞内的代谢变化。 共聚焦激光扫描显微镜 观察活细胞、活组织：ＬＳＣ