生物学第八讲 PCR及其衍生技术在动物传染病防制中的应用课件.pptVIP

（三）反向PCR 常规PCR是扩增两个已知序列之间的DNA片段，而反向PCR（Inverse PCR）则是对已知序列两侧的一段未知序列进行扩增分析。具体方法为先用一种能酶解已知序列侧面的限制性内切酶消化已知序列，再利用T4DNA连接酶使具有黏性末端的未知序列环化，然后用另一种限制性内切酶切开已知序列。经过上述线状—环状—再线状的变化，使原位于已知序列两侧的未知序列变为位于已知序列的中央，这样经PCR扩增便可获得大量未知序列。利用反向PCR可对未知序列扩增后进行分析，适用于基因游走、转位因子和已知序列DNA旁侧病毒整合位点分析等研究。 * * * 第八讲 PCR及其在疾病防制中的应用 一、 PCR的概念 二、 PCR基本原理 三、 PCR反应体系 四、 PCR的过程及条件 五、 PCR衍生技术 六、 PCR在动物疾病防制中的应用 聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）又称体外核酸扩增技术，是利用DNA聚合酶依赖于DNA模板的特性，模拟天然DNA的复制过程，在附加的一对引物之间诱发重复的聚合酶反应。PCR包括DNA模板的变性（denaturation）、引物退火（annealing）及多核甘酸链的延伸（extension）