天然雌核发育与异精效应 课件.pptVIP

天然雌核发育与异精效应 第一节 雌核发育及特点 第二节 雌核发育的二倍体化 第三节 雌核发育二倍体的鉴定与应用 第四节 异精效应 第一节 雌核发育及特点 1.1概念 雌核发育（gynogenesis）是指卵子在精 子的刺激下，依靠自身的细胞核发育成个体 的一种有性生殖方式。 人工雌核发育（artificial gynogenesis）用 遗传失活的精子激活卵子的发育，精子不参 与合子核的形成，卵子紧靠雌核发育成胚的 现象。 第二节 雌核发育的二倍体化 正常的卵子发育的胚胎是单倍体，孵化时呈现显著的畸形，出现一系列单倍体综合症:头（眼）小，体躯较短，围心腔扩大、水肿、尾椎弯曲、色素减少、血液循环不全等畸形 等 。因此，要获得具有生存能力的雌核发育个体，就要使卵子的染色体加倍。 2.1雌核发育的细胞学原理 主要包括卵子发生和成熟卵的受精生物 学两部分。 卵子发生：涉及雌核发育子代如何保持 倍性（即保持染色体数目）， 成熟卵的受精生物学：要了解同源或异 源精子进入雌核发育卵后父本染色体在合子 中的命运。 正常卵子的形成：鱼类产出的成熟卵子一般处于第二次减数分裂中期；与鱼类不同，海产贝类排出的成熟卵子一般停留在第一次减数分裂的前期和中期，只有在受精或经激活后卵子才能第一次减数分裂和第二次减数分裂，释放第一、第二极体，然后进入有丝分裂，即卵裂。 根据卵子染色体加倍的时期不同，雌核发育二倍体划分为3种类型：第一极体抑制型、第二极体抑制型和卵裂抑制型。因此鱼类的雌核发育二倍体只有第二极体抑制型和卵裂抑制型，贝类雌核发育二倍体有3种类型。 银鲫：雌核发育受精状态下，卵质中促进精核核膜 解体的功能异常，从而不能像正常受精那样融合，也就 不能发育为雄性原核。（楼允东，1999） 草鱼：精核在卵内主要有两种变化，始终保持固缩 状态；形成雄性原核。（邓岳松，1998） 中国对虾：精核有原核化和迁移运动现象，但没有 融合。（蔡难儿，1995） 太平洋牡蛎和皱纹盘鲍：形成雄性原核，但不形成 染色体而是形成致密的染色质小体。（Li等，2000） 2.2天然雌核发育鱼类的染色体组成 天然雌核发育鱼类的染色体组成具有 某些共同特点，除了偶尔产生三倍体亚马 逊花鳉、克氏美洲银汉鱼、德国和日本的 一种银鲫为2倍体（2n=100）以及日本的 四倍体关东系银鲫外，一般为三倍体。 2.3 人工诱发雌核发育 目前，人工诱发雌核发育都要经过两个主要步骤： 一是精子染色体的失活（诱发卵子雌核发育）； 二是卵子染色体体的二倍体化。 2.3.1 精子染色体的遗传失活 精子染色体的遗传失活是人工诱导雌核发育的关键技术，目前 所采用的方法一般包括γ、X射线、UV射线、化学试剂、杂交诱 导。 1.辐射处理 （1）γ、X射线 ? 原理是诱发染色体断裂。当达到一定剂量时，能够使精核中的DNA完全 被破坏，Hertwig效应。 ?具有较好的穿透力，但不安全；经γ、x射线处理过的精子生存力和受精 力都较差,在雌核发育的胚胎中还可能存在大量的精子染色体碎片。 （2）UV射线 ? 安全、廉价、易得，但穿透力弱。 ? 主要作用在DNA形成胸腺嘧啶二聚体,使两链见氢键减弱，使DNA结构局 部变形,从而阻碍DNA 的正常复制和转录。 ? DNA可能在光复活酶的光复活作用下所修复 2.化学药品处理 ?甲苯胺蓝(Toludine blue) 、乙烯脲( Ethylenewea) 、二甲基硫酸盐(Dimethylsulfate) 以及丫啶黄(Trypaflavine)和噻嗪(Thiazine)等 ? 处理浓度、处理时间有待进一步研究 Hertwig效应：通常伴随着对精子的放射线照射剂量的增高，失活精子受精后胚胎的成活率降低;当照射超过某一剂量时，成活率反而回升（当照射达到某一剂量时染色体断片完全脱落，胚胎仅靠由卵子来的染色体发育，从而成活率回升）。 2.3.2卵子染色体的二倍体化。 人工诱发二倍体雌核发育的方法与诱发多倍体的方法基本相同。不同的是：前者用的是经辐射处理的失活精子激活卵子，而后者用的是正常精子受精的卵子。 诱导原理：鱼类产出的成熟卵子一般处于第二次减数分裂中期，第一极体在卵子产出前已排出，因而只能通过抑制第二极体或第一次卵裂两种方法产生雌核发育二倍体。与鱼类不同，海产贝类排出的成熟卵子一般停留在第一次减数分裂的前期和中期，只有在受精或经激活后卵子才能第一次减数分裂和第二次减数分裂