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分子生物学概述 王丽颖 分子生物学教研室 E-mail: wlying@ 教学团队简介： 分子生物学教研室 吉林大学基础医学院 Tel: 0431 E-mail: fzswx2013@163.com 王丽颖，教授，主任 wlying@ 万敏，教 授 王华，副教授 孙巍，副教授 杨光，讲 师 房明丽，讲师 张培因，副主任技师 吴秀丽，实验师 卫红飞，实验师 王燕媚，技术员 胡小平，技术员 王丽颖 孙巍 万敏 房明丽 王华 杨光 张淼旻 副教授（海外博士引进人才） min ‘ 主要内容 分子生物学的基本含义 分子生物学的研究基础及思维方法 分子生物学的发展历程 分子医学时代 本课程的内容安排 1. 分子生物学的基本含义 顾名思义， 在分子水平上研究生物学的问题 在分子水平上认识生物的生命规律 世间生物体的生命是有规律可循的 ——Francis Crick In 1970, —Central dogma在Nature上正式发表，被称为“分子生物学的中心法则” 也就是说， 按照中心法则的指引是可以操控生命的 Protein DNA RNA Translation Transcription Reverse transcription RNA editing RNA replication Replication DNA是遗传物质 1953年，DNA双螺旋结构模型 因此， 分子生物学的基本含义是： 围绕着分子生物学的中心法则，在生物大分子水平上，重点在DNA（遗传物质）水平上，研究生物分子与生物体之间的关系，从而揭示生命的活动规律。 Protein DNA mRNA 为什么将重点放在DNA水平上？ 为什么中心法则成为分子生物学的理论核心？ 如何按照这样的思路从事研究？ 2. 分子生物学的研究基础及思维方法 Protein DNA mRNA DNA是遗传物质 触碰DNA —就会影响RNA和蛋白质 —就会影响信号途径 —也会影响信号分子 —最终影响的是生物体 DNA能碰吗？ DNA具有可操作性的结构基础 1? 2? 3? 4? 5? H OH B H O P ?O O? O O P ?O O? O O P ?O O? O ? ? ? O (1) DNA的化学结构 G A T C OH RNA 碱基可以修饰变构 甲基化 因此， DNA的化学结构赋予其可操作性的特征 H2O H O P ? O O ? O O P ? O O? O O P ? O O ? O CH2 5 H 4 3 2 1 OH O CH2 5 H 4 3 2 1 O P ? O O ? O 5 ? ? ? O O H (2) DNA的化学基团 CH2 5 H 4 3 2 1 O P ? O O ? O 5 O H 双脱氧核苷酸 ddNTP 3’-OH ? 3’-H Sanger法测序技术的本质原理 磷酸二酯键 PPi 焦磷酸（PPi） 连接一个核苷酸，产生一个焦磷酸 焦磷酸测序技术的本质原理 A G C T T C G A 5’ 3’ 5’ 3’ = = ? ? 3’-5’磷酸二酯键 (3) DNA的双螺旋结构 链间的氢键是一种力(非共价) 外界因素可以影响力的大小 双链可以形成 双链也可以分开 两条链需要互补配对 异源双链可以形成 核酸杂交技术 DNA变性 DNA复性 gccgggcgcg gtggcgcgtg cctgtagtcc cAGCTactcg ggatgctgag gctggaggat cgcttgagtc caggagttct gggctgtagt gcgctatgcc gatcgggtgt ccgcactaag ttcggcatca atatggtgac ctcccgggag cgggggacca ccaggttgcc taaggagggg tgaattcgcc caggtcggaa acggagcagg tcaaaactcc cgtgctgatc agtagtggga tcgcgcctgt gaatagccac tgcactccag cctgggcaac atagcgagac cccgtctct 5’- -3’ (4) DNA的序列结构 DNA序列是有含义的 —阅读框架（ORF）可以编码氨基酸 —序列元件可以结合蛋白质或作为酶切位点 PCR 基因 ? 遗传的最小单位，编码蛋白质 基因表达调控元件 ? 负责控制基因的表达 5’-GAATTC-3’ 3’-CTTAAG-5’ 回文序列 Exon 1 Exon 2 Exon 3 Exon 4 Intron 1 Intron 2 Intron 3 ATG 5’-非翻译区 3’