微生物学实验显微镜油浸系物镜的使用.pptVIP

《微生物学》 实验 目 录 实验一 显微镜油浸系物镜的使用 ……………1 实验二 细菌形态的观察 ……………………5 实验三 细菌的革兰氏染色 ……………………8 实验四 酵母菌的形态观察 ……………………9 实验五 霉菌的形态观察 ……………………10 实验六 细菌数量的测定(设计性实验) ………13 实验七 培养基的配制 ……………………14 附实验 消毒与灭菌 ……………………12 实验八 微生物的接种方法………………………16 实验一 显微镜油浸系物镜的使用 一、实验目的和实验内容 目的：熟悉显微镜低倍镜和高倍镜的使用技术，了解油浸系物镜的基本原理，掌握油浸系物镜的使用方法。 内容：1、学习油浸系物镜的使用方法。 2、用油镜观察细菌三型和放线菌染色装片。 二、实验材料和用具 细菌三型(枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌等)、放线菌的染色装片，香柏油、二甲苯，显微镜、擦镜纸。 三、操作步骤 （一）观察前的准备 1、将显微镜置于平稳的实验台上，镜座距离实验台边沿约4cm。坐正，练习用左眼观察。 2、调节光源：将低倍镜转到工作位置，将光圈完全打开，聚光器升至与载物台相距约1μm左右。 观察染色装片时，光线宜强；观察未染色装片时，光线不宜太强。 （二）低倍镜观察染色装片 首先上升镜筒，将细菌三型染色装片置于载物台上，用标本夹夹住，将观察位置移至物镜正下方，物镜降至距离装片0.5cm处，适当缩小光圈然后两眼从目镜观察，转动粗调节器使物镜逐渐上升（或使镜台下降）至发现物象时，改用细调节器调节到物象清楚为止。 移动装片，把合适的观察部位移至视野中心。 （三）高倍镜观察 眼睛离开目镜从侧面观察，旋转转换器，将高倍镜转至正下方，注意避免镜头与玻片相撞。再由目镜观察，仔细调节光圈，使光线的明亮度适宜。用细调节器校正焦距使物象清晰为止。将最适宜观察部位移至视野中心，绘图。 不要移动装片位置，准备用油镜观察。 （四）油镜观察 1、提起镜筒约2cm，将油镜转至正下方。在玻片标本的镜检部位（镜头的正下方）滴一滴香柏油。 2、从侧面注视，小心慢慢降下镜筒，使油镜浸在油中至油圈不扩散为止，镜头几乎与玻片接触，但不可压及装片，以免压碎玻片，损坏镜头。 3、将光圈调亮，左眼从目镜观察，用粗调节器将镜筒徐徐上升（切忌反方向旋转），当视野中出现物象时，改用细调节器调节到物象清楚为止。 4、再次观察 提起镜筒，换上放线菌染色装片，依次用低倍镜、高倍镜和油镜观察，绘图。重复观察时可比第一次少加香柏油。 （五）镜检完毕后的工作 1、提起镜筒，或降下载物台 2、移开物镜镜头 3、取出装片 4、清洁油镜 油镜使用完毕后，须用擦镜纸擦去镜头上的香柏油，再用擦镜纸沾少许二甲苯擦掉残留的香柏油，最后再用干净的擦镜纸擦干残留的二甲苯。 5、擦净显微镜，将各部分还原。将物镜呈“八”字形降下，不可使其正对聚光器，同时降下聚光器，转动反光镜使其镜面垂直于镜座。最后套上镜罩，对号放入镜箱中，置阴凉干燥处存放。 四、注意事项 1、使用油镜必须按先用低倍镜和高倍镜观察，再用油镜观察的程序操作。 2、下降镜头时，一定要从侧面注视。 3、使用二甲苯擦镜头时，注意二甲苯不能过多，以防溶解固定透镜的树脂。 4、注意保持显微镜的洁净，对金属部分要用软布擦拭，擦镜头必须用擦镜纸，切勿用手或用普通布、纸等，以免损坏镜头。 五、实验报告 分别绘出在高倍镜和油镜下观察到的枯草芽孢杆菌及金黄色葡萄球菌的形态，注明物镜放大倍数(100)和总放大率(光学最大1000-1500倍) 。 附:显微镜放大倍数 = 接目镜放大倍数 X 接物镜放大倍数 * * *