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野生与种植伏毛铁棒锤对小菜蛾杀虫活性比较 　　摘要：采用浸渍法测定野生与种植伏毛铁棒锤（Aconitum flavum Hand Mazz）乙醇提取物及生物碱对小菜蛾（Plutella xylostella）的触杀活性。结果表明，野生与种植伏毛铁棒锤30.0 mg/mL乙醇提取物对小菜蛾的72 h校正死亡率分别为86.67%、90.00%，LC50分别为13.14、12.37 mg/mL；野生与种植伏毛铁棒锤生物碱20.0 mg/mL用量时小菜蛾72 h校正死亡率均为90.00%，LC50分别为6.535、6.576 mg/mL。野生与种植伏毛铁棒锤提取物对小菜蛾的触杀活性相近。研究结果可为伏毛铁棒锤这一野生植物资源的有效保护提供一定的依据。 　　关键词：野生；种植；伏毛铁棒锤（Aconitum flavum Hand Mazz）；小菜蛾（Plutella xylostella）；杀虫活性 　　中图分类号：S436.341.2+4；TQ453.3 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）22-5470-03 　　伏毛铁棒锤为毛茛科乌头属植物伏毛铁棒锤（Aconitum flavum Hand Mazz）块根，是中国传统民族药材，主要用于风湿性关节炎、骨折、跌打瘀痛等的治疗[1，2]。伏毛铁棒锤又称为铁棒锤、断肠草等，主要分布于中国西藏北部、甘肃、宁夏南部六盘山区等地。现代药理研究表明，伏毛铁棒锤可作为一类重要的植物源杀虫剂，其主要活性成分为乌头碱、3-乙酰乌头碱、去氧乌头碱等生物碱类[3]，防治害虫效果好[4]，作为新型植物源农药的开发利用前景广阔。 　　伏毛铁棒锤一直以野生品入药，随着采挖量增加，资源日趋枯竭，产地生态环境也受到极大破坏。为了解野生与种植伏毛铁棒锤的杀虫效果差异，保护野生资源和生态环境，本试验研究了野生与种植的伏毛铁棒锤乙醇提取物及生物碱对小菜蛾的杀虫活性，对比其作为杀虫剂的杀虫效果差异，为开展人工规范化种植和合理开发利用伏毛铁棒锤提供理论依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　1.1.1 供试昆虫 小菜蛾（Plutella xylostella）采用油菜苗室内饲养，由宁夏大学能源化工重点实验室饲养继代（饲养环境温度20～28 ℃，相对湿度65%～75%，光照12 h/d），挑选生长发育状态一致的健康3龄幼虫供试。 　　1.1.2 供试植物 野生伏毛铁棒锤采自甘肃省境内，采集时间为10月；种植伏毛铁棒锤采自宁夏回族自治区固原市隆德??。室内阴干，粉碎，过40目筛，粉末装入塑料薄膜袋中密封并置于阴暗处保存。 　　1.2 方法 　　1.2.1 伏毛铁棒锤乙醇提取物的制备 采用乙醇浸渍超声波辅助法浸提。分别称取100 g野生与种植的伏毛铁棒锤粉末，加1 L 95%乙醇，室温浸泡24 h后超声波提取30 min，过滤，滤渣再加溶剂浸提，重复提取3次，合并3次滤液用旋转蒸发仪减压浓缩，蒸干溶剂，得乙醇提取物浸膏。分别称取野生与种植的伏毛铁棒锤乙醇提取物，以50%丙酮为溶剂，分别配制成终浓度为30.0、25.0、20.0、15.0、10.0、5.0 mg/mL的供试药液，置于4 ℃冰箱保存。 　　1.2.2 伏毛铁棒锤的生物碱的制备 伏毛铁棒锤乙醇提取物加50%丙酮溶解后用2%盐酸调至弱酸性，用乙酸乙酯萃取，收集乙酸乙酯层，合并萃取液，减压浓缩得乙酸乙酯萃取物。收集其余部分用浓氨水调节pH至9～10，用氯仿进行萃取直至用碘化铋钾检验无生物碱为止，合并萃取液，减压浓缩得生物碱浸膏。分别称取野生与种植伏毛铁棒锤生物碱浸膏，以50%丙酮为溶剂，分别配制成终浓度为20.0、15.0、10.0、5.0、2.5 mg/mL的供试药液，置于4 ℃冰箱中保存备用。 　　1.2.3 触杀活性测试 小菜蛾触杀活性采用浸渍法[5]。挑选健康、虫体大小一致的小菜蛾3龄幼虫，在供试液中浸10 s，迅速取出，并用干净的吸水纸吸去多余药液，然后将浸药试虫转入垫有保湿脱脂棉的培养皿中，放入用纱网制成的圆柱形容器，饲喂新鲜甘蓝叶片。于处理后24、48、72 h分别记录死虫数、活虫数。虫体腐烂或变软、用毛笔轻触无反应则认为其已死亡。观察幼虫的死亡情况。对照（CK）用50%丙酮溶液处理。每处理10头，3个重复，计算死亡率、校正死亡率。以x为处理液浓度值的对数值，y为校正死亡率的几率值，建立回归方程，计算LC50。 　　1.2.4 数据统计分析 用DPS 7.05统计软件和Excel 2007软件对试验数据进行分析，差异性用Duncans新复极差法分析。 　　2 结果与分析 　　2.1 野生与种植伏毛铁棒锤的乙醇提取物对小菜蛾触杀活性比较 　　野生与种植伏毛铁棒锤乙醇提取物对小菜蛾3龄幼虫生物