2010版药典微生物限度检查法及指导原则培训.pptVIP

微生物限度检查法可用于判断非规定灭菌制剂及原料、辅料是否符合药典的规定， 也可用于指导制剂、原料、辅料的微生物质量标准的制定，及指导生产过程中间产品微生物质量的监控。 本指导原则将对标准和方法中的特定内容及标准的应用做进一步的说明。 细菌、霉菌酵母菌总数检查 1、总则 2、检验量 3、供试液的制备 3、供试液的制备 1.微生物限度检查过程中，如需要使用表面活性剂、灭活剂及中和剂，在确定其能否适用于所检样品及其用量时，除应证明该试剂对所检样品的处理有效外，还须确认该试剂不影响样品中可能污染的微生物的检出（即无毒性），因此无毒性确认试验的菌株不能仅局限于验证试验菌株，而应当包括产品中可能污染的微生物。 2.供试液制备方法、抑菌成分的消除方法及细菌、霉菌及酵母菌计数方法应尽量选择微生物限度检查法中操作简便、快速的方法，且应避免损伤供试品中污染的微生物。对于抑菌作用较强的供试品，在供试品溶液性状允许的情况下，应尽量选用薄膜过滤法进行试验。 3. 微生物限度检查法（附录ⅪJ）收载的离心沉淀法仅适用于制备细菌计数或控制菌（细菌）检查用的供试液，规定的500 转/分钟、不超过3 分钟只用于去除供试液中的沉淀物。采用该方法时，供试液中的样品颗粒大小、粘稠度及污染的微生物大小，转速等直接影响着样品中微生物的回收， 易造成检验结果不能真实反映供试品的污染情况。因此，供试液制备时尽量避免使用该方法，更不宜采用高速离心沉降集菌。 4、细菌、霉菌及酵母菌计数 ---计数培养基的适用性检查 4、细菌、霉菌及酵母菌计数 ---计数培养基的适用性检查 4、细菌、霉菌及酵母菌计数 ---计数培养基的适用性检查 4、细菌、霉菌及酵母菌计数 ---菌液的制备、保存 4、细菌、霉菌及酵母菌计数 ---计数方法的验证 3.进行验证试验时，若因没有适宜的方法消除供试 品中的抑菌作用而导致微生物回收的失败，应采用能 使微生物生长的更高稀释级供试液进行方法验证试验。 此时更高稀释级供试液的确认要从低往高的稀释级 进行，但最高稀释级供试液选择应根据供试品应符合的 微生物限度标准和菌数报告规则，如供试品应符合的微 生物限度标准是1 克细菌数不得过1000cfu，那么最高稀 释级是1：10-3。 若采用允许的最高稀释级供试液进行验证试验还存在一株或 多株试验菌的回收率达不到要求，那么应选择回收情况最接近 要求的方法进行供试品的检测。如： 某种产品对某试验菌有较强的抑菌性能，采用薄膜过滤法的 回收率为40%，而采用培养基稀释法的回收率为30%，那么应 选择薄膜过滤法进行该供试品的检测。 在此情况下，生产单位或研制单位应根据原辅料的微生物质 量、生产工艺及产品特性进行产品的风险评估，以保证检验方 法的可靠性，从而保证产品质量。 4、细菌、霉菌及酵母菌计数 ---供试品检查（变更） 4、细菌、霉菌及酵母菌计数 ---供试品检查菌数报告规则（变更） 4、细菌、霉菌及酵母菌计数---供试品检查（薄膜过滤法） 控制菌检查 1.控制菌检查用培养基的适用性检查 1.控制菌检查用培养基的适用性检查 -----菌液制备 1.控制菌检查用培养基 ---的适用性检查所用菌株及检测项目表 1.控制菌检查用培养基 ---适用性检查所用菌株及检测项目表 1.控制菌检查用培养基 ---适用性检查所用菌株及检测项目表 1.控制菌检查用培养基 ---适用性检查项目及结果判断 1.控制菌检查用培养基 ---适用性检查项目及结果判断 2.控制菌方法验证 ---菌种、菌液的制备 2.控制菌方法验证---验证方法 2.控制菌方法验证---结果判断 3.供试品控制菌检查法---变动