豇豆根腐病菌生物学特性及室内杀菌剂毒力测定.docVIP

豇豆根腐病菌生物学特性及室内杀菌剂毒力测定 　　摘要：对引起湖北武汉地区豇豆根腐病的病菌（茄类镰刀菌，Fusarium solani Schl.）进行了生物学特性及室内杀菌剂毒力研究。结果表明，病菌菌丝生长的适宜温度为25～35 ℃；适宜pH 6～9；光照有利于菌丝生长；病菌能够利用多种碳源和氮源，最适碳源是麦芽糖，最适氮源是硝酸钠；菌丝的致死温度为65 ℃（10 min）。室内杀菌剂毒力测定结果表明，70%甲基托布津超微可湿性粉剂对病菌菌丝抑制效果最好，其后依次为50%硫磺·多菌灵可湿性粉剂和40%福星乳油，这3种杀菌剂均可用于防治豇豆根腐病；80%多菌灵可湿性粉剂和10%苯醚甲环唑水分散粒剂的EC50也较低，也可作为防治豇豆根腐病的杀菌剂。 　　关键词：豇豆根腐病菌（Fusarium solani Schl.）；生物学特性；杀菌剂；毒力测定 　　中图分类号：S432.4+4；S436.411 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）22-5479-03 　　为进一步了解湖北武汉地区豇豆根腐病菌（茄类镰刀菌，Fusarium solani Schl.）的生物学特性，筛选出防治效果较好的药剂，本试验系统研究了该菌在不同光照、温度、pH、碳源、氮源条件下的生长特性及菌丝的致死温度，并测定了7种杀菌剂对该菌的抑制作用，以期为该病害的防治提供参考。 　　1 材料与方法 　　1.1 供试病菌 　　豇豆根腐病菌菌株JGF，由武汉市农业科学技术研究院武汉市蔬菜科学研究所于2009年9月从该所基地采集标样，经分离培养获得，并进行了致病性测定、形态学和分子生物学鉴定[1，2]。 　　1.2 不同光照对菌丝生长的影响 　　病原菌在PDA培养基上培养5 d后，用打孔器从菌落边缘取直径6 mm菌丝块，接种于PDA培养基平板上，每皿接种1个菌丝块。将接种后的平皿置于HP250GS型智能人工气候培养箱培养，温度25 ℃。设置连续黑暗、连续光照、12 h/d光暗交替3个处理（光源为普通日光灯，18 W，距离22 cm），每个处理3个重复，4 d后用十字交叉法测量菌落直径。 　　1.3 不同温度对菌丝生长的影响 　　病原菌在PDA培养基上培养5 d后，用打孔器从菌落边缘取直径6 mm菌丝块接种于PDA培养基平板上，每皿接1个菌丝块。设置5、10、15、20、25、30、35、40 ℃共8个温度处理，将接好菌种的平??分别置于不同温度的恒温培养箱培养，每个处理5个重复。7 d后用十字交叉法测量菌落直径。 　　1.4 不同pH对菌丝生长的影响 　　用1 mol/L NaOH和1 mol/L HCl溶液调节 PDA培养基pH，终值分别为3、4、5、6、7、8、9、10、11、12，然后在不同pH的平板中央接种直径6 mm的菌丝块，置于25 ℃恒温培养箱培养，每个处理3 个重复，5 d后用十字交叉法测量菌落的直径。 　　1.5 不同碳源、氮源对菌丝生长的影响 　　以Czapek培养基为基础培养基[3]，用含碳量相同的葡萄糖、麦芽糖、乳糖、木糖、果糖、可溶性淀粉代替其中的蔗糖，以不加碳源作对照。以Czapek培养基为基础培养基，用含氮量相同的尿素、硝酸钠、硝酸铵、氯化铵、精氨酸代替其中的硝酸钾，以不加氮源作对照。打取直径为6 mm的菌丝块接种在不同碳、氮源培养基平板中央，每处理3个重复，置于25 ℃恒温培养箱中，5 d后采用十字交叉法测量菌落直径。 　　1.6 菌丝致死温度测定 　　用6 mm打孔器在活化好的PDA培养基菌落边缘取菌丝块并置于无菌试管中，加入2 mL无菌水。分别在35、40、45、50、55、60、65、70 ℃水浴锅中处理10 min后取出迅速冷却，将菌丝块取出置于PDA平板上25 ℃恒温培养，5 d后观察菌丝生长情况，每处理重复5次。 　　1.7 不同杀菌剂对豇豆根腐病菌的室内毒力测定 　　1.7.1 供试药剂 70%甲基托布津超微可湿性粉剂（西安美邦药业有限公司）、40%福星乳油（上海农乐生物制品股份有限公司）、80%多菌灵可湿性粉剂（美国农友集团有限公司）、50%硫磺·多菌灵可湿性粉剂（河北冠龙农化有限公司）、75%百菌清可湿性粉剂（成都皇牌作物科学有限公司）、80%福·福锌可湿性粉剂（河北冠龙农化有限公司）、10%苯醚甲环唑水分散粒剂（北京绿色农华植保科技有限公司）。 　　1.7.2 含药平板制备 根据预备试验结果，确定各个供试药剂的浓度梯度和配制时的系列剂量，70%甲基托布津超微可湿性粉剂、80%福·福锌可湿性粉剂、10%苯醚甲环唑水分散粒剂浓度梯度为31.25、62.50、125.00、250.00、500.00 μg/mL；80%多菌灵可湿性粉剂、50%硫磺·多菌灵可湿性粉剂、