环境微生物——实训报告.docVIP

实训报告 一、前言： 在我们所生活的环境中，微生物是无处不在的，微生物存在于空气环境中、水环境中以及土壤环境中，绝大多数的微生物对人、动物和植物等都是有益的，有些是必不可少的。但是，微生物也有不好的一面，有的微生物会对环境造成污染，就会引起水体变质、空气中有害微生物含量超标等，甚至会让接触者或者饮用者患上各种疾病。为了正确而且客观的了解水质以及空气的卫生情况，加强水质与空气的卫生管理，保障人们的健康生活，并对防止某些传染疾病的发生提供科学的依据，我们必须对水源和空气中的微生物指标进行检测。从而，在张晓辉老师和谢国莉老师的带领下，我们进行了两星期的校内实训。这次实训老师给了很多个题目，采取的是抽签方式做实验，我们所抽到的实训内容为“游泳池水中大肠菌群的测定”与“食堂空气卫生微生物的指标检测。” 二、实验方案： ㈠．实验所用到的材料与设备： 1．实验材料：试管、烧杯、锥形瓶、小试管、培养皿、移液管、酒精灯、接种环、载玻片、钢锅、报纸、绳、胶头滴管、洗耳球、洗瓶、滤纸、擦镜纸、pH试纸、玻璃棒、蛋白胨（天津市华东试剂厂，250g）、牛肉膏（北京奥博生物技术有限责任公司，500g）、乳糖、氯化钠（北京化工厂，500g）、溴甲酚紫—乙醇溶液（北京化工厂，25g)、无水亚硫酸钠（北京化工厂，500g）、磷酸氢二钾（北京红星化工厂，500g）、琼脂（北京奥博星生物技术有限责任公司，100g）、碱性品红乙醇溶液（中国医药公司北京采购供应站经销，25g）、草酸铵结晶紫染液、卢戈氏碘液、95%乙醇（北京化工厂，500mL）、血球计数板、番红染液、蒸馏水、样液（游泳池水）。 2．实验设备：电子天平（奥豪斯中国地区）、电子显微镜（重庆奥特光学仪器有限公司）、高压蒸汽灭菌锅（上海博迅实业有限公司医疗设备厂，型号：YXQ---SG46---280SA）、恒温培养箱（哈尔滨市光明医疗仪器厂）、烘箱（上海精密实验设备有限公司，型号：DHG---907OA）、万用炉（北京市永光明医疗器厂）、空气微生物采样器（北京仪器检测有限公司）。 ㈡．实验步骤： 游泳池水中大肠菌群的测定： ⑴．多管发酵阶段（12月20号） ①．实验前准备： ａ．实验材料与设备的准备： 试管（10支）、烧杯（2个）、锥形瓶（3个）、小试管（12支）、培养皿（7套）、移液管（5mL/支）、酒精灯（一盏）、接种环（一根）、载玻片（一片）、钢锅（一个）、报纸（若干）、绳（若干）、胶头滴管（一根）、洗耳球（一个）、洗瓶（一个）、滤纸（一张）、擦镜纸（若干）、pH试纸（一片）、玻璃棒（一根）、蛋白胨（一瓶）、牛肉膏（一瓶）、乳糖(一瓶)、氯化钠（一瓶）、16g/L溴甲酚紫—乙醇溶液（3mL）、磷酸氢二钾(一瓶)、琼脂（一袋）、碱性品红乙醇溶液（一瓶）、草酸铵结晶紫染液(一瓶)、卢戈氏碘液（一瓶）、95%乙醇（一瓶）、血球计数板（一个）、番红染液（一瓶）、蒸馏水（1000mL）、样液（游泳池水300mL）、电子天平（一台）、电子显微镜（一台）、高压蒸汽灭菌锅（一台）、恒温培养箱（一台）、烘箱（一台）、万用炉（一台）。 ｂ．玻璃器皿的灭菌： 用报纸把烧杯、试管、锥形瓶、培养皿、移液管，小试管等玻璃器皿分别进行包装，并用绳子绑好，放入烘箱中进行灭菌，灭菌时温度应为160℃，时间以为2小时，才能把细菌完全灭掉，放置一旁备用。 ｃ．水样的采集： 取一个已灭菌的大烧杯，用报纸包好，并去到学校的游泳馆，取一杯水样，用报纸包好并迅速送回实验室。 ②．三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液的配制： 利用电子天平称取蛋白胨30g、牛肉膏9g、乳糖15g、氯化钠15g全部倒入钢锅中放在加热器上加热并溶解于1000mL蒸馏水中，调整pH为7.2~7.4。最后加入16g/L溴甲酚紫乙醇溶液3mL充分混均后，分装到锥形瓶中，并用报纸包好等待灭菌。 ③．培养液的灭菌： 将分装好的培养液放入高压蒸汽灭菌锅中进行灭菌，灭菌时温度应为115℃，压力应为0.07MPa，时间应为20分钟，取出置于一旁备用。 ④．培养液的分装： 取来已灭菌的10只试管与2个烧杯，取来一盏酒精灯并点燃，将试管与烧杯靠近酒精灯火焰旁，将已灭菌的培养液倒入其中，试管中分别倒入5mL的培养液，烧杯中倒入50mL培养液，盖好，并用标签纸给标上序号（试管为1至10，烧杯为1、2），放置一旁备用。 ⑤．接种水样： 点燃酒精灯，把试管与烧杯靠近酒精灯火焰旁，将从游泳池取回的水样加入到其中，试管中各加入10mL，烧杯中各加入100mL，并取来小试管，将其倒扣入试管与烧杯中，倒扣进去后必须保证小试管内无气泡。 ⑥．培养： 将已接种水样的培养液摇均，放入到恒温箱中进行培养，培养温度应37℃，时间为24小时，24小时后取出观察。 ⑵．观察多管发酵的结果与平板分离阶段（12月21号） 观察多管发酵