‘琯溪蜜柚’贮藏期间汁胞粒化与木质素代谢关系.docVIP

‘琯溪蜜柚’贮藏期间汁胞粒化与木质素代谢关系 　　摘 要： 【目的】为了探讨‘琯溪蜜柚’贮藏过程中汁胞粒化与木质素的关系，以及外源激素对木质素合成与汁胞粒化的影响，【方法】以‘琯溪蜜柚’果实为材料，利用水杨酸（SA）处理低温贮藏的‘琯溪蜜柚’果实，测定了贮藏过程中汁胞粒化指数、木质素含量以及木质素合成途径中关键酶的活性。【结果】结果表明，汁胞粒化指数、木质素含量、木质素合成关键酶的活性在整个贮藏过程中逐渐升高，SA处理的木质素合成的关键酶PAL、CAD和POD的活性均显著低于对照，木质素含量和粒化指数也显著低于对照。木质素含量与粒化指数的相关系数为0.943，木质素合成酶的活性与木质素含量的相关系数为0.981。【结论】研究认为，‘琯溪蜜柚’采后贮藏期间汁胞粒化程度与汁胞中木质素含量为正相关的关系，适宜浓度的SA对汁胞粒化的抑制作用主要是通过抑制木质素合成途径中关键酶的活性，减少木质素的合成，从而减轻汁胞粒化的程度。 　　关键词： ‘琯溪蜜柚’； 汁胞粒化； 水杨酸； 木质素 　　中图分类号：S666.3 文献标志码：A 文章编号：1009-9980？穴2013？雪02-0294-05 　　汁胞粒化是柑橘类果树常见的一种生理现象。‘琯溪蜜柚’[Citrus grandis （L.） Osbeck ‘Guanximiyou’]的汁胞粒化是成熟后期和采后贮藏期间发生的生理病害，其主要表现为汁胞异常膨大、变硬，有汁胞木质化，汁味变淡，造成果实食用品质下降，甚至丧失商品价值，给果农带来很大的经济损失。潘东明等[1]研究发现‘琯溪蜜柚’汁胞在粒化过程中伴随着细胞壁加厚，纤维、半纤维增多，高尔基体增加，核体积增大，并且粒化汁胞会出现多核仁现象。木质素是由木质素单体经氧化耦合形成的化合物，其氧化过程主要发生在次生加厚的细胞壁[2-3]。Ilan等[4]观察到柚汁胞粒化与汁胞细胞的木质化有直接关系，但与汁胞中木质素合成的关系尚未明确。 　　木质素单体的合成主要经过苯丙酸途径进行，包括了子系列的酶促反应和羟基化、甲基化及还原反应，最终生成3种单体物质[2]，合成的木质素单体被过氧化物酶或者漆酶氧化成木质素[3， 5-6]。木质素生物合成途径的关键酶包括苯丙氨酸解氨酶（PAL）、肉桂醇脱氢酶（CAD）和过氧化物酶（POD）等[7]。在枇杷中的研究发现，水杨酸（salicylic acid，SA）能抑制低温贮藏过程中PAL、CAD和POD的活性[8]。潘东明等[9]研究表明KT、2，4-D、NAA等能抑制汁胞粒化的发生和发展，但未见SA抑制柚汁胞粒化发生的报道，且SA与木质素合成的关系尚不明确。我们拟用SA处理成熟的‘琯溪蜜柚’果实，探讨在贮藏过程中，木质素的合成与汁胞粒化的关系，以及外源激素SA如何影响木质素的合成与汁胞粒化的发生。 　　1 材料和方法 　　1.1 材料 　　供试材料采自福建省漳州市平和县新桥镇小溪村大坑果园内1株30 a树龄的‘琯溪蜜柚’树，于成熟期采果，每个处理60个果，采收后立即送至实验室。预冷的‘琯溪蜜柚’果实分别采用0.5 g·L-1（SA1）、1.0 g·L-1（SA2）和1.5 g·L-1（SA3）水杨酸（SA）浸果60 min处理，然后晾干，装入保鲜袋；以不浸泡处理为对照，均置于7 ℃下贮藏。贮藏过程中每20 d取出部分果实用于试验，各处理均设置3次重复。 　　观察‘琯溪蜜柚’果的粒化情况，记录粒化指数，并从中随机取粒化和未粒化的汁胞用于木质素含量和相关酶活性的测定。 　　1.2 方法 　　1.2.1 ‘琯溪蜜柚’粒化指数的统计 果实粒化程度用粒化指数表示，按照潘东明等[1]的方法统计。 　　1.2.2 汁胞木质素含量的测定 参照鞠志国[10]的方法，取3.5 g汁胞加入10 mL沸水，冷却后加入86% H2SO4 25 mL，室温下充分搅拌水解4 h，后加入蒸馏水250 mL，加热煮沸1 h，冷却后用预先烘干至恒质量的G4砂心漏斗抽滤，再用蒸馏水洗涤，洗涤液用10% BaCl2检查，以不出现BaSO4沉淀为止，G4砂心漏斗烘干后称重。 　　1.2.3 汁胞PAL活性的测定 参照Cheng等[11]的方法，并略作修改。 　　PAL的提取： 取1 g汁胞于研钵中，并加入少量的提取介质，冰浴研磨成匀浆，搅匀，10 000 ×g离心15 min。上清液即为待测酶液。 　　PAL的测定： 反应体系含1.0 mL酶液、0.02 mol·L-1的L-苯丙氨酸1.0 mL和0.05 mol·L-1 pH 8.8硼酸缓冲液2 mL，总体积为4.0 mL。反应液于290 nm测其吸光值，以反应液1 h变化0.001吸光值为1个酶活性单位，PAL活性以U·g-1 FW表示，重复测定3次。 　　1.2.