顶空液液萃取—气相色谱—质谱法用于白术挥发性成分分析.docVIP

顶空液液萃取—气相色谱—质谱法用于白术挥发性成分分析 　　摘要：采用高温顶空液相萃取再转移的方法，对中药白术中挥发性成分进行萃取分离富集，采用顶空液液萃取气相色谱质谱（LPLPEGM）联用法进行测定，并与传统水蒸汽蒸馏法（）提取的挥发性成分进行对比。对各种测定条件和影响因素进行了考察，最佳萃取条件为：1mLPEG为高温萃取剂，样品用量12g，萃取温度12℃，萃取时间6min，再将萃取剂用1mL正己烷进行反萃取后进行GM分析；采用LPLPEGM鉴定了个组分，占总组分含 　　量918%；鉴定了1个组分，占总组分含量9712%。两种方法共同检测到的组分有29个，均以苍术酮（Atractylone）含量最高。结果表明，两种方法所提取的组分基本相同，可用于白术挥发性成分的测定。 　　关键词：顶空液液萃取；气相色谱质谱；挥发性成分；白术；分离富集 　　1引言 　　挥发性有机化合物（Volatileorganiccompounds，VOs）常用提???法有水蒸汽蒸馏（）、 　　超声萃取（UE）、微波辅助萃取（MAE）、超临界流体萃取（E）、固相微萃取（PME）等。上述方法均存在一些缺点，如法提取时间长，挥发油中只能提取到油溶性成分；PME 　　法萃取头易碎、寿命短，成本较高，多次使用存在交叉污染等问题。顶空液相微萃取（LPME） 　　是近年发展的一种溶剂用量少、装置简单、灵敏度较高的样品前处理方法。但也存在萃取剂多为 　　低沸点有机溶剂，液滴体积小，不易操作，易挥发甚至掉落[7]，不易高温萃取，萃取时间短等缺点。为克服LPME的缺陷，本研究在其基础上建立了一种分析挥发性成分的新型前处理方法 　　——顶空液相萃取再转移分离富集气相色谱质谱法，简称顶空液液萃取（eadspaceliquidphase 　　liquidphaseextractionLPLPE）分离富集GM测定法。采用不易挥发的高沸点试剂聚乙二 　　醇（PEG）作为高温萃取剂代替传统的有机溶剂，可极大地提高萃取温度和延长萃取时间；摒弃 　　单滴悬挂的方式，加大萃取剂的用量，有效避免了液滴不稳定易脱落挥发等问题；扩大了样品与 　　高温萃取剂之间的顶空交换面积，提高了萃取效率；用传统的有机溶剂对PEG层进行反萃取，将 　　反萃取液进行GM分析。利用所建立的LPLPEGM测定了白术中挥发性成分。本方法 　　具有操作简单，快速，成本低，有机溶剂和样品用量少等特点，并有效克服了LPME液滴本 　　身易挥发跌落等问题，同时提高了相对油相中水溶性物质的灵敏度。 　　2实验部分 　　21仪器与试剂 　　G689NM97N气相色谱质谱联用仪（美国Agilent公司）；GZX97ME电热恒温 　　鼓风干燥箱（上海博讯实业有限公司）；QE1高速中药粉碎机（武义县屹立工具有限公司）； 　　顶空萃取瓶（6mm×mm）；顶空收集瓶（2mm×8mm，自制）。 　　聚乙二醇（PEG）2、、6、8，上海化学试剂厂；乙酸乙酯、丙酮、 　　正己烷等均为分析纯。白术（产自浙江）。 　　22色谱质谱条件 　　PM色谱柱（m×2mm×2μm）；高纯氦（99999%）流速：8mLmin；进样口温 　　度：2℃；程序升温：初温8℃，以℃min升至16℃，保持min；再以8℃min升至2℃，保持min。质谱条件：EI离子源；电子轰击能量：7eV；倍增电压：129V；离子源温度：2℃；接口温度：28℃；质量扫描范围：～amu；溶剂延迟：min。 　　2实验方法 　　21顶空液液萃取取12g白术样品（12目）置于顶空萃取瓶底部四周，取1mLPEG于顶空收集瓶内，置于萃取瓶中央，盖紧瓶盖，放入12℃恒温箱内萃取6min，用1mL正己烷反萃取顶空收集瓶内的萃取剂，振荡混合再静置，待其分层后，吸取上层正己烷1μL进行GM分析。 　　22水蒸汽蒸馏 　　取g白术粗粉用挥发油提取器按常规水蒸汽蒸馏法提取6h，挥发油经无水Na2O干燥， 　　收油率为11%，精密称取挥发油mg，用正己烷稀释倍。吸取1μL进行GM分析。 　　结果与讨论 　　1顶空液液萃取分离富集装置 　　顶空液液萃取装置与操作步骤如图1所示。将中药粉末置于顶空萃取瓶底部四周，再将盛有 　　特定萃取剂的顶空收集瓶置于顶空萃取瓶中央，适当加大萃取剂的用量和增加萃取剂液的气液接 　　触面，有利于萃取尽快达到平衡和提高效率。为避免挥发物的损失，顶空萃取瓶采用磨口塞适当 　　密闭，并留有微气路以便加热时气体膨胀泄压，顶空萃取瓶整体置于恒温箱中。经一定时间恒温 　　萃取，用传统的有机溶剂对高温萃取剂中的富集物进行反萃取，振荡静置分层后，吸取上层待测 　　物进行GM分析。 　　2顶空液液萃取条件的优化 　　21