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超声波法提取麦冬多糖工艺研究

超声波法提取麦冬多糖工艺研究   摘 要:麦冬多糖是麦冬的主要成分之一,随着中西方医药的发展,麦冬多糖的提取法越来越先进。应用超声波法提取麦冬多糖的工艺研究:用功率超声波单细胞粉碎法提取麦冬多糖、超声波法提取对麦冬多糖结构和抗氧化的分析。   关键词:中国化工贸易 超声波 麦冬多糖 提取   麦冬多糖以药理和生理方面的功能,引起医学界的广泛关注。它的提取法有多种,其中比较传统的是水浸醇沉法、稀酸法、稀碱法和酶法,而超声波和微波法是近代比较先进的提取法。文章阐述应用超声波提取麦冬多糖的工艺研究,证明超声波提取麦冬多糖工艺是有市场前景的。   一、功率超声波提取麦冬多糖的工艺研究   1.实验材料与方法   1.1 材料与试剂   材料主要是麦冬的块根,麦冬为百合科多年生草本植物,麦冬多糖是麦冬的主要成分之一。   试剂是95%乙醇、苯酚、浓硫酸氯化钠、氢氧化钠、乙酸硼酸、三氯化铁、三氯乙酸、抗坏血酸、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、铁氰化钾等均为分析纯。   1.2 仪器和设备   超声波清洗器、紫外可见分光光度计、超声波细胞粉碎机、电子天平、冷冻干燥机。   1.3实验方法   将麦冬块根放在60度干燥箱中烘干粉碎,再用超声波细胞粉碎机将麦冬绞碎,两次提取后,沉淀,离心,透析,真空干燥后得到的提取物便是麦冬粗多糖。   1.4糖含量的测定   苯酚-硫酸法,用葡萄糖做标准曲线   首先配置标准葡萄糖溶液和6%苯酚溶液。分别取葡萄糖溶液0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml放进10ml容量瓶中加水定容,然后配置苯酚溶液。   分别移取上述标准溶液2ml放在干燥烧杯中,分别加入1.0ml苯酚和5倍浓硫酸,摇匀。加沸水恒温显色15分钟,自然冷却至室温。以吸光度对浓度画工作曲线。运用多糖提取率公式算出麦冬多糖含量。多糖提取率=提取到的多糖质量/麦冬粉质量X 100%   1.5麦冬多糖的分离   取一定质量的麦冬多糖加一定毫升的水,然后加入CTAB(十六烷基三甲基溴化氨),产生沉定,静置4小时,离心20分钟,收集沉定,用蒸馏水溶解透析,然后冷冻干燥,得到的白色粉末就是麦冬多糖API。   1.6还原能力测定   将多糖溶液加2倍多糖溶液的0.2mol/LPBS和2倍0.1%铁氰化钾,放在试管中混匀,50度水浴反应20分钟,速冷加入10%三氯乙酸 ,混匀后离心,然后用三氯化铁混匀,加蒸馏水,用蒸馏水做无能力还原对照,抗坏血酸作为有还原能力对照,测麦冬多糖的体积梯度,每个样品重复三次,取平均值。   2.实验结果   通过对不同功率的麦冬多糖的全波长扫描,结果表明,均在260~280nm范围内无明显吸收峰,证明不含有蛋白质和核酸,在198nm处有多糖特征吸收峰证明含有麦冬多糖。   通过不同的超声波功率提取麦冬多糖,麦冬多糖的分子量是不同的,整体趋势是随着超声功率的增加,麦冬多糖的分子量呈现集中、分散、集中的变化,随着超声波的增大,到400W时,麦冬多糖更大的分子量89万已经被提取出来,而且伴随很小的麦冬多糖的分子量。如果超过400w,麦冬多糖的较大分子量就会消失,这说明一些多糖键会随着超声功率分解,而超声波再增大出现的最小分子量为1万,这说明超声功率的增大使麦冬多糖的分子量呈现较小分布,但超声波对麦冬多糖的剪切是有限度的。Frenkel也认为:“多糖的长度被剪切到一定限值时,超声波所引起的瞬间弯曲已不足以产生进一步裂解。   3.超声波与传统提取法相比具有优势   用以上实验程序用传统方法重新提取麦冬多糖,测量出用超声波和传统方法的麦冬多糖百分比,发现超声波提取法不但便捷而且纯度大。这表明超声波提取麦冬多糖比传统法具有优势   二、超声波提取法对麦冬多糖结构和抗氧化活性的影响   1.仪器和试剂   原子力显微镜、气相色谱仪、超声波提取的麦冬多糖粉末。   2.气相色谱的分析   根据上文测定麦冬多糖WBP和SBP的单糖组成。画出水解这两种单糖所得各种糖硅烷化衍生物的气相色谱图,将其与混合标准单糖的气相色谱图对比。由对比可知,麦冬多糖的成分主要是阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖以及半乳糖组成的杂多糖。与传统热水法相比,超声波提取法并没有改变麦冬多糖的单糖组成成分。   3.电子显微镜分析   取适量的用超声波提取的麦冬多糖粉末少量,直接粘在样品台上,用洗耳球轻轻吹拭,然后在离子仪器中进行真空喷镀,最后置于环境扫描电子显微镜下观察。分别画出放大5000倍的麦冬多糖单糖的图像。由超声处理后,麦冬多糖的外观外貌有很大变化。说明超声波提取多多糖表面形貌有较大影响。   4.超声波提取对麦冬多糖的抗氧化性影响   根据上文做一个麦冬多糖总还原能力测定,测定麦冬多糖单糖的还原能力。物

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