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TGFβ1基因509CT多性粥硬化性梗死系 　　摘要：目的：探讨转化生长因子β1 （Transforming growth factor β1，TGF-β1）基因-509CT多态性与长沙汉族人群动脉粥样硬化性脑梗死（atherosclerosis cerebral infarction，ATCI）的关系。方法：利用聚合酶链反应（polymerase chain reaction， PCR）扩增技术及限制性片段长度多态性技术（restriction fragment length polymorphism， RFLP）检测150例脑梗死患者及125例健康体检者的-509CT基因型，利用统计学方法分析该基因多态性与ATCI的关系。结果：ATCI组TT基因频率比对照组高，P=0.01，OR=1.86，95% CI，（1.14-3.02），ATCI组T等位基因频率较对照组亦高， P=0.02， OR=1.53，95% CI（1.08-2.18），而 CC及TT基因型频率分布差异无统计学意义（P=0.60，P=0.09）。结论：TGFβ1基因-509CT可能与ATCI相关，T等位基因可能增加ATCI发病风险。 　　关键词：TGFβ1 基因多态性；脑梗死 　　脑梗死占脑卒中85%～90%，其中又以动脉粥样硬化性脑梗死（atherosclerosis cerebral infarction， ATCI）最多见。目前公认脑梗死是一种多因素疾病，其不具备经典的遗传模式特征，但孪生子、家族研究及动物模型研究一致表明遗传因素在脑梗死及其危险因素中有着重要作用[1]。随着人类单体型计划的逐步完善，越来越多的基因被证实与脑卒中相关[2]。 　　动脉粥样硬化是动脉粥样硬化性脑梗死的病理基础，研究发现动脉粥样硬化其实为一炎症反应过程，转化生长因子β1 （Transforming growth factor β1，TGF-β1）作为一种多功能生长因子，参与人体生理及病理过程中，其与动脉粥样硬化密切相关[3，4]。人体TGF-β1生成受到TGF-β1基因的调控， Grainger DJ[5]等证实在动物体外和体内，TGF-β1的血浆浓度与基因多态性相关，其中-509CT位点的多态性能影响TGF-β1的表达，故-509CT位点多态性与动脉粥样硬化及相关疾病（如冠心病、脑梗死等）的关系成为研究热点。已有研究证实该基因多态性与脑梗死相关[6-8]。湖南长沙是世界脑卒中的高发地区[9]，基于遗传背景差异，本研究旨在通过病例对照研究，了解-509CT多态性与长沙地区汉族人群ATCI的关系。 　　1对象与方法 　　1.1研究对象：动脉粥样硬化性脑梗死组（ATCI组）：2008年1月至2011年10月在湖南省人民??院神经内科住院首次发病的动脉粥样硬化性脑梗死患者共150例，均为汉族，祖籍长沙，其中男80例，女70例，平均年龄61.81±11.48岁。所有病例均符合1995年全国第四次脑血管疾病学术会议修订的诊断标准[10]，经头颅CT和（或）MRI确诊。排除心源性、动脉炎、外伤、血液疾病、药物、肿瘤、脑血管畸形或者动脉瘤等引起的脑卒中；排除有严重肝肾疾病、甲状腺疾病、血液疾病和最近三个月服用雌激素患者；所有患者采血前近半年内未接受任何降脂和抗凝药物治疗。对照组：为同期在湖南省人民医院体检中心参加体检的健康体检者125例，均为汉族，其中男65例，女60例，平均年龄60.94±7.87岁病史询问中无脑卒中家族史，无肝、肾、血液系统、自身免疫性疾病、甲状腺疾病、妊娠及脑血管病史。所有入选者签署知情同意书，本研究已经通过湖南省人民医院医学伦理委员会审查。脑梗死组与对照组在性别、年龄、高血压病、糖尿病、吸烟、饮酒、血脂上差异无统计学意义（P0.05）。 　　1.2研究方法 　　1.2.1DNA提取：所有被检测者均清晨空腹抽取5 mL静脉血， EDTA 抗凝，按酚-氯仿方法提取DNA。 　　1.2.25 TGFβ1-509CT基因分型：-509CT （rs1800469）引物正向：5’-GGCAGTTGGCGAGAACAGT-3’，引物反向： 5’-ACCCAGAACGGAAGGAGAGT-3’，引物引自参考文献[11]，经NCBI数据库Blast （http：///blast/Blast.cgi）确定特异性高后，由美国invitrogen公司（上海）合成。 PCR体系25μL（100 ng gDNA， 10×PCR 反应缓冲液2.5μl，20 pmol正向引物， 20 pmol反向引物， 5 mmol dNTPs， 2 U TaqDNA聚合酶）。72 ℃再延伸5 min，反应条件：94℃预变性7min，94℃变性35s， 60℃退火35s，72℃延伸35s，35