电位法快速检测几种叶菜类食物中农药残留.docVIP

电位法快速检测几种叶菜类食物中农药残留 　　摘要： 本文通过介绍电位法快速检测的工作原理和方法，对电位法快速检测叶菜类食物农残的实施步骤及效果进行实例剖析，并与检测农残的常规紫外分光光度法进行对比，提出了一种新型的现场快速检测方法。 　　关键词：电位法 快速检测 叶菜类 有机磷农药 农药残留 　　一、前言 　　叶菜类蔬菜，其生长周期短，是人体每天必需营养的重要来源之一。人类对叶菜类蔬菜食用叶片或全株，对其食用量大，且难以通过去皮等方式清除残留农药；蔬菜农药残留超标，会直接危及人体的肝、肾等重要器官和神经系统；农药在人体内蓄积超过一定量度后会导致一些慢性疾病，如肌肉麻木、咳嗽等，甚至会诱发糖尿病、血管疾病和癌症等，所以人们对叶菜类蔬菜的农药残留尤为关注。 　　二、我国农药残留标准体系及检验分析方法 　　由于农药残留对人类及其他生物危害极大，我国对有机磷农药实行严格管理，规定了食品中各种农药的MRL值（即食品中农药最高残留限量标准），来衡量食品中农药是否超过标准。现在，国家标准已对124种中的106种农药施行相关管理标准，由此形成了我国农药残留管理标准体系[1]。 　　对农残最高限量的监控，相应的检验方法有三条思路：一是制定单一组分的配套检验方法，二是研究适于现场分析的快速检验方法，三是研究多组分系统分析方法。 　　目前我国有机磷农药残留的分析方法有气相色谱法、薄层色谱法以及快速测定方法——酶抑制法。 　　本研究依据酶抑制原理[2]，以乙酰胆碱酯酶为检测用酶，建立快速测定有机磷农药残留的电位法， 与国家规定的最大残留限量（MRL） 比较，检验该法对农药的最低检测限（LDC）是否可以达到MRL限值要求，对该方法检测农残的灵敏度作评价，同时与常规的分光光度法的灵敏度相比较，以研究电位法是否可以作为新型的快速现场检测方法。 　　三、实验操作与数据 　　1、 实验原理 　　本研究以蝇头中活性较高的乙酰胆碱酯酶为检测用酶，乙酰胆碱为底物；有机磷农药会抑制乙酰胆碱酯酶活性[3-4]，依据酶抑制原理，当乙酰胆碱酯酶活性受到抑制时，与底物乙酰胆碱作用生成的乙酸量相应减少，酶被抑制程度与反应体系的产酸减少量呈线性相关；使用雷磁PHS-3C精密pH计，检测反应前后pH值变化，应用正交函数原理及SPSS软件处理数据，测定蔬菜中有机磷农药最低残留限量并获取其线性方程及灵敏度，以电位法来建立快速检测有机磷农药残留的方法。 　　2 、 实验样品 　　叶菜类：生菜、小白菜 　　非叶菜类：生姜、大蒜 　　3、 仪器与设备 　　5 、 试验方法 （电位法） 　　本实验共分为两个部分： 　　第一，采用电位法快速测定有机磷农药残留， 与国家规定的最大残留限量（MRL）比较，检测和评价该方法对于农残检测的最低检测限（LDC）及灵敏度。 　　第二，检测蔬菜样液对酶的抑制率，与常规的分光光度法比较灵敏度。 　　5.1 确定最佳试验条件 　　假设室温对最佳因素条件影响不显著，按梯度进行单因素实验，并使用正交实验确定本方法最佳的测定条件为酶量为0.10ml，室温反应时间为10min，农药用量6ml，55℃水浴反应35min、灭活时间为3min。 　　试验证明，室温对试验的结果有影响但不显著，假设成立。 　　5.2 确定不同农药的酶抑制灵敏度 　　使用SPSS 13.0 for windows软件进行数据处理，做曲线拟合及回归分析，以抑制率对农药浓度的负对数作工作曲线，如图1： 　　同样方法，分别计算出氧化乐果、乐果、敌敌畏的抑制率，见表3；使用SPSS 13.0 for windows软件进行曲线拟合及回归分析，以抑制率对农药浓度的负对数做工作曲线，得出线性方程、灵敏度和相关系数，如表4所示： 　　注：y为抑制率；x为农药浓度的负对数 　　对于同一种乙酰胆碱酯酶，当农药溶液浓度达到抑制酶活的程度时，其抑制率将≥50%。由表4可知，所测农药浓度与对酶抑制率的相关系数都在0.91以上，相关性较好，电位法满足对有机磷农药残留快速检测的要求。 　　由表4可知，电位法可检测的氧化乐果、乐果、敌敌畏最低检测限（LDC）分别为：5.56×e– 6 mg/kg、8.04×e– 4mg/kg、3.997×e– 4 mg/kg。而国家规定的最大残留限量（MRL）为：氧化乐果≤0.20mg/kg、乐果≤1.00mg/kg、敌敌畏≤0.20mg/kg[9]。电位法所能检测的农药的最低检测限（LDC）达到国家规定的最大残留限量（MRL），用电位法快速测定农药残留的方法可行。 　　5.3 确定本方法适用的蔬菜种类 　　将两种叶菜类和两种非叶菜类蔬菜，剪成1cm左右见方的碎块，在最佳试验条件下，加入0.5μg/ml的农药溶液分别处理，结果如表5