临床检验进展及传病检测.pptVIP

遗传病是指遗传物质发生突变所引起的疾病。可分为三大类： 单基因病 多基因病 染色体病 基因诊断是以DNA 和RNA为诊断材料，应用分子生物学技术，通过检查基因的结构及其表达功能来诊断疾病的方法和过程。 片段性突变（大片段缺失、插入或倒位） 染色体片段如染色体病 整个基因 数个外显子 倒位 点突变 单核苷酸取代 少数核苷酸缺失或插入 动态突变 多态性三核苷酸重复序列的扩增 如果某种遗传病是由于基因缺失造成的，可通过检测受检者是否缺失该基因来直接判断其基因型。如果致病突变或病因还不清楚，但有与其紧密连锁的多态性位点，通过该位点状态的连锁分析进行检测。不同类型的突变有不同的诊断途径： 1.突变已知时用直接检测法—突变检测 2.突变未知或突变已知但突变类型较多时用间接诊断法—多态性连锁分析 一、直接检测法 是指直接检测基因的致病突变，因此其前提是被检致病基因的正常序列和结构已被阐明。 二、多态性连锁分析 连锁是指同一条染色体上和致病基因相邻近的基因一起被遗传，可以作为遗传标记，这样只要鉴定标记的存在，就可以判断受检者是否带有致病基因。 典型的连锁分析包括以下程序： 确定分析方法 首选PCR方法，检测RFLP和缺失的Southern印迹方法已被PCR产物的酶切法或多重PCR取代。 选择合适的多态性标记位点 多态性分析 多家系核心成员（父母及先症者）及待测个体进行多态性分析，确定标记位点的基因型 分析、判断并解释得到的结果 选择合适的多态性标记位点 一个好的标记位点应具有以下特性： 分析方法必须简单可行，取材方便 结果容易判读，四核苷酸重复序列多态性比二核苷酸重复序列多态性好 等位基因数码要多，有较高的多态性信息量，是被测个体在该位点有较高的机会为杂合子 与疾病基因连锁紧密程度越高越好，连锁越紧密发生重组的可能性越低，结果的可靠性越高。 首先根据孟德尔定律遗传模式，通过核心家系成员的多态性资料，确定父源或母源等位基因的标记，即确定致病基因与标记点等位片段的连锁相，然后根据待测个体获得的父源或及母源标记等位基因确定其是否携带致病基因。 家系中的关键成员（父母）为标记位点杂合子，这样才能区分两天同源染色体。 子代中存在患病的纯合子，这样才能确定致病基因与哪条染色体的标记位点共同遗传 任何一种遗传病，单独使用一种多态性位点，均有相当一部分父母的染色体无法区别。需要联合使用多种标记位点，以提高诊断率 受检的亲代必须为生物意义上的亲代 点突变的检测 片段性突变的检测 动态突变的检测 已知点突变的检测 与PCR相关的技术 以核苷酸探针杂交为基础的技术 * * 临床检验进展及遗传病检测 医学检验学院 2010、5 1.血液一般检查 2.尿液一般检查 3.粪便检查 4.体液与分泌物检查 5.骨髓检查及常用染色技术 6.溶血检查 7.出凝血检查 8.血液流变学检查 检验这些项目的方法主要采用一些化学方法、免疫学方法等。近年来，许多分子生物学方法也开始应用于临床，对疾病的基因进行检测。 血液学检验 血液学检验的临床意义 人体在某些生理情况下或发生疾病时,常可引起血液细胞成分发生数量和质量的变化。通过对血液中RBC、WBC、PLT数量和形态改变的检验,常有助于确定某些疾病的诊断,或可作为辅助诊断。故血液常规检验在临床上重要的临床意义。特别是对疾病鉴别诊断提供重要临床依据。 血细胞分析仪的发展 20世纪50年代美国库尔特首先发明了电阻式血细胞分析仪 20世纪80年代Coulter公司又利用电阻、激光、高能电磁波等几项技术共同检测、综合分析，使血细胞分析个更加准确 20世纪90年代初从细胞膜的结构差异进行分析 目前，半自动血细胞分析仪在发达国家已经被淘汰，取而代之的是全自动分析仪 血细胞计数主要是采用血细胞分析仪，其主要原理：根据血细胞非传导的性质，在浸入电解质的微孔管内外各有一电极，两电极形成 电流，细胞经过微孔的瞬间以引起电阻的变化为基础，进行血细胞计数和体积测定。 A.正常红细胞形态 B 口形红细胞  血液检验与疾病鉴别 非血液系统疾病 呼吸、消化、 类白血病反应、妇科 血液系统疾病 血友病、骨髓瘤等 血液学检验的进展 随着医学科学技术的发展和各学科的相互渗透，当代的临床血液学检验已发生根本性变化。在检验科室内，它已经是一个业务内容广泛、拥有大量自动化精密仪器、由许多具备血液学基础及临床知识和娴熟技术的人员组成的临床专业科室。其业务内容已扩展到包括血细胞计数与形态学分析、红细胞病理相关分析、白细胞病理相关分析以及血栓与止血相关分析等方面。 血细胞计数及形态学