tip30抑制胰腺癌生长和转移的作用分析-effect of tip 30 on inhibiting growth and metastasis of pancreatic cancer.docx

本研究由国家自然基金面上项目资助目录英文缩写词(1)中文摘要(3)英文摘要(5)前言(7)正文(9)第一部分TIP30在胰腺癌组织中的表达及与临床指标的关系(9)一、实验材料(9)二、实验方法(10)三、实验结果(12)四、讨论(15)第二部分TIP30阻滞胰腺癌生长和转移的体外研究(17)一、实验材料(17)二、实验方法(21)三、实验结果(35)四、讨论(44)第三部分TIP30阻滞胰腺癌生长和转移的体内研究(49)一、实验材料(49)二、实验方法(50)三、实验结果(53)四、讨论(57)全文总结及展望(59)参考文献(61)文献综述(64)博士在读期间发表论文和参加科研工作情况(79)致谢(80)英文缩略词表缩写英文全称中文全称AmpAmpicillin氨苄青霉素ARAntigenRetrieval抗原修复bpBasePair碱基对BSABovineSerumAlbumin牛血清白蛋白BSPChIPBisulfitegenomicsequencingPCRChromatinImmunoprecipitation亚硫酸盐测序PCR染色质免疫共沉淀DABDAPIDMSO3,3–Diaminobenzidine4,6–diamidino–2–phenylindoleDimethylSulfoxide3,3–二氨基联苯胺4,6–二脒基–2–苯基吲哚二甲基亚砜DNMTsMethyltransferases甲基转移酶dNTPDeoxyribonucleotideTriphosphate脱氧核糖核苷三磷酸DTTDithiothreitol二硫苏糖醇E.ColiEscherichiacoli大肠杆菌EDTAEthyleneDiamineTetraaceticAcid乙二胺四乙酸EMTFBSEpithelial–mesenchymal–transitionFetalbovineserum上皮–间质转化胎牛血清GAPDHHEGlycerAldehyde–3–PhosphateDehydrogenaseHaematoxylinandeosin甘油醛–3–磷酸脱氢酶苏木素伊红染色HRPHorseradishPeroxidase辣根过氧化物酶缩写英文全称中文全称IHCImmunohistochemistry免疫组织化学IPTGIsopropyl–beta–D–thiogalactoside异丙基–β–D–硫代吡喃半乳糖苷KDaKiloDalton千道尔顿LBLuria–BertaniLB培养基MSPMethylationspecificPCR甲基化特异性PCRODOpticalDensity光密度值PAGEPolyacrylamidegelelectrophoresis聚丙烯酰胺凝胶电泳PBSPhosphatebufferedsaline磷酸盐缓冲液PCRPolymerasechainreaction多聚酶链式反应PMSFPhenylmethylsulfonylfluoride苯甲基磺酰氟PVDFPolyvinylidenefluoride聚偏二氟乙烯RT–PCRReverseTranscriptase-polymerasechainreaction逆转录酶–多聚酶链式反应SDSSodiumdodecylsulfate十二烷基磺酸钠TAETris–acetate–EDTATris–乙酸–EDTATEMEDTetramethylethylenediamine四甲基乙二胺X–gal5–Bromo–4–chloro–3–indolyl–β–D–galactopyranoside5–溴–4–氯–3–吲哚–β–D半乳糖苷作者：薛瑞华学科专业：外科学（普外）导师：刘荣TIP30抑制胰腺癌生长和转移的作用研究研究目的：中文摘要胰腺癌发生、发展是一个多因素、多步骤和多基因参与的复杂过程，这期间基因突变、原癌基因激活、抑癌基因失活及其导致一系列信号转导的异常等分子病理学改变贯穿了胰腺癌病变的全过程。TIP30是一个潜在的肿瘤抑制基因，在多种肿瘤细胞中都存在表达水平下调。本课题旨在探讨TIP30在胰腺癌中的表达情况及与患者临床指标、预后的关系，探讨TIP30抑制胰腺癌生长和转移的作用。研究方法：1.利用免疫组织化学染色技术检测胰腺癌病例的癌组织及其癌旁组织中TIP30的表达水平。应用相应统计学方法分析TIP30表达水平与患者年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤分期、分化程度等多项临床指标之间的关系。2.TIP30抑制胰腺癌细胞生长和转移的体外研究：应用Real-timePCR技术检测6株胰腺癌细胞系中TIP30的表达水平。利用慢病毒为载体的RNA干扰技术（Lv-shTIP30）下调TIP30基因的表达，用Lv-AcTIP30过表达胰腺癌细胞株MiaPaC