tgf β1p55pik通路在肺癌细胞增殖中的作用及机制研究-role and mechanism of tgf β 1p55 pik pathway in proliferation of lung cancer cells.docx

独创性声明 本人郑重声明，本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果的总结。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其 他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集 体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本人将承担本声明引起的一切 法律后果。 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有 权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和 借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据 库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。  本论文属于 保密□ ，在 年解密后适用本授权书。 不保密□。  （请在以上方框内打“√” ） 学位论文作者签名： 指导教师签名： 日期： 年 月 日 日期： 年 月 日  目 录 中文摘要 ................................................................................................... 1 英文摘要 ................................................................................................... 2 前 言 ......................................................................................................... 4 正 文 ......................................................................................................... 5 材料和方法.......................................................................................... 5 实验结果 ........................................................................................... 12 讨 论 ................................................................................................. 18 参考文献 ........................................................................................... 20 文献综述 ................................................................................................. 22 致 谢 ....................................................................................................... 39  TGF-β 1/p55PIK 通路在肺癌细胞增殖中的作用及机制研究 硕士研究生： 金源 导 师： 胡俊波 教授 华中科技大学同济医学院附属同济医院胃肠外科中心/肿瘤研究所 中文摘要 目的: 本实验室前期研究表明，p55PIK 能与细胞增殖核抗原（PCNA）直接结合， 导致 PCNA 与 DNA 聚合酶 δ 结合增多，从而促进细胞 DNA 合成和细胞增殖。本研 究拟探讨 TGF-β1 对 p55PIK 表达的影响及其机制，初步阐明 TGF-β1 可以通过调控 p55PIK 的表达来抑制肺癌细胞的增殖。 方法: 用 TGF-β1 处理肺腺癌细胞 PC-9，观察其对 p55PIK mRNA 和蛋白表达水 平的影响。利用双荧光素酶报告基因系统，观察 TGF-β1 对 p55PIK 启动子活性的影响。 通过 RNA 干扰技术初步阐明 TGF-β1 调控 p55PIK 的下游信号通路。运用 Brdu 掺入 法检测 TGF-β1 及 p55PIK 对肺癌 PC-9 细胞 DNA 合成的影响，并观察高表达 p55PIK 能否削弱 TGF-β1 对 PC-9 细胞 DNA 合成的抑制作用。 结果: 在