第10章-微生物基因重组.pptVIP

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第10章 微生物的基因重组 第1节 原核生物的基因重组 第2节 真核生物的基因重组 第3节 微生物菌种保藏 基因突变增加了遗传多样性,以适应环境的变化。但基因突变的概率一般较低,因此在亿万年的进化过程生物主要通过基因重组的方式保持物种遗传多样性。来自两个(两个以上)不同亲本的遗传物质在同一细胞内经过交换、重新组合而产生具有新性状子代个体的过程叫基因重组,由此产生的重组子代可以将重组DNA分子遗传给后代。 真核生物一般采用有性生殖进行基因重组,涉及两个性细胞的融合,整个染色体组参与基因重组;在低等的真核生物中,两个体细胞的结合也可完成基因重组;真菌还可以借助准性过程进行基因重组。 原核细胞没有明显的性别分化,没有典型的有性过程,但原核细胞可以通过细胞间的暂时沟通,供体细菌只提供部分染色体进行基因重组。这种重组只涉及染色体的一部分,所以重组以后的细胞称为局部合子,以区别典型的有性生殖中细胞融合以后形成的合子。 第1节 原核生物的基因重组 1 转化 2 接合 3 转导 1 转化 来自供体DNA片断或质粒DNA转移到受体菌并整合进染色体的过程叫转化。转化后的受体菌叫转化子。转化可分为3个阶段: 感受态阶段 受体菌细胞容易接收DNA片断的生理状态叫感受态。 感受态是细菌的一种遗传特性,并且受培养条件的影响,感受态一般在对数中期或后期出现,因菌种而异。 DNA的结合和吸收 细胞壁上的受体蛋白与DNA片断相互作用,吸附DNA。 结合的DNA双链被核酸内切酶切成约14kb大小的片断,然后再被分解成单链,一条单链被降解,另一条单链进入细胞。 整 合 进入细胞的DNA单链取代受体菌染色体上的同源片断的一条单链,被取代的那条单链被降解。 这样形成的杂合双链经修复后将成为含有供体基因的转化子或正常的受体DNA。 2 接合 通过细胞的接触进行基因的转移,叫接合。受体菌叫接合子。接合是借F因子(致育因子)实现的。F因子是一种小分子的双链环状DNA,约有40个基因。 带有F因子的细胞叫F+细胞, 无F因子的叫F-细胞。 每个F+细胞带有1~多个性丝。 3 转导 供体基因通过噬菌体作为中间载体转移至受体的过程叫转导。转导后的受体菌叫转导子。转导分为两种: 普遍性转导 噬菌体在装配时,会错把大小与其DNA相似的细菌染色体片断包装进壳体中,形成转导噬菌体。当这种噬菌体侵染下一个寄主细胞后,就把供体的DNA片断带进受体细胞。 供体片断可与受体染色体上同源片断配对,通过双交换整合进受体染色体,形成稳定的转导子。 约有90%的供体DNA片断并不能整合进受体染色体上,能表达却不能复制,只能传递给一个子细胞,形成微小的菌落,叫流产转导。 专性转导 原噬菌体受诱导从寄主DNA上脱离下来时,因不正常切割,会偶尔把其整合位点两侧的寄主基因切下并包装进壳体,进而带进下一个受感染的细胞,并可能通过整合带进受体染色体。 第2节 真核生物的基因重组 1 有性生殖 2 准性生殖 1 有性生殖 真菌有性生殖的过程、结合方式、特点、类型等参见真核微生物。 2 准性生殖 (1)异核体 (2)二倍体化 (3)有丝分裂交换 (体细胞交换) (4)单元化 (1)异核体 真菌一个细胞内含有两个不同的核。 (2)二倍体化 异核体中的两个核一般不融合,只以10-6概率发生融合,形成杂合二倍体。这种二倍体形成后,相当稳定,可以进行有丝分裂。 (3)有丝分裂交换(体细胞交换) 杂合的二倍体核有丝分裂时,一般不交换,但是也可以很低的频率发生同源染色体交换,产生各种重组子。 (4)单元化 在有丝分裂中,姐妹染色体的着丝粒可能以极小的概率不分裂,形成2n+1或2n-1的非整倍体核,2n+1可能失去一条染色体再次成2n,但是也可能使杂合基因纯合化。2n-1不稳定,将会逐步失去其他染色体成为n,也可导致基因重组。 第3节 微生物菌种保藏 1 菌种的衰退 2 菌种的复壮 3 保藏菌种的方法 1 菌种的衰退 (1)菌种衰退的表现 (2)衰退的原因 (3)衰退的防止 (1)菌种衰退的表现 生长速度缓慢,产孢子越来越少。 生产能力下降。 对宿主的毒力减弱,寄生能力下降。 生活力下降,抵抗不良环境条件能力减弱。 (2)衰退的原因 从遗传角度分析菌种衰退主要由以下原因造成: 自发突变 杂交重组 异核现象 从环境条件分析菌种衰退主要有以下原因造

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