猪精原干细胞的建系及诱导为多能性生殖干细胞的研究-生物学;微生物学专业论文.docxVIP

AbstractAbstractSpermatogonialstemcells(SSCs)aretheuniqueadultstemcellsinmalesthatcantransmitgeneticmessagestooffspringandhavetheabilityofself-renewalanddifferentiation．TheestablishmentandgradualimprovementofculturesystemsforSSCsinmicenotonlyallowagoodunderstandingofregulatory．mechanismsunderlyingproliferationanddifferentiation，butalsosuggestthatSSCshaveuniqueadvantagesingenerationoftransgenicanimalsandregenerativemedicine．ItmightbesafertoconvertSSCstoembryonicstemcells-likepluripotentgermlinestemcells，comparedtovirusvectortransducedinducedpluripotentstem(iPS)cells．AttemptshavebeenmadetoproducetransgenicmiceandratsbyallogenictransplantationofSSCs．Atpresent,thereisnorealembryonicstemcellsCanbeusedtoproduceimprovedvarietiesorgeneticallymodifiedoffspringsforlargeanimalssuchaspigs，earleandsheep，SOthisstudyiscommittedtoresearchlargeanimal’Sgeneticmanipulationanddevelopmentbyreplacingembryonicstemcellswithpluripotentgermlinestemcells．ThisstudyexploredtheisolationandpurificationandcultureconditionofpigSSCsandthewaytoconversepigSSCsintopluripotentgermlinestemcellsandgotSOmenewresearchadvancesonconversingpigSSCsintopluripotentgermlinestemcells．Onthisbasis，anewapproachbyconversingpigSSCsintopluripotentgermlinestemcellswillbestudiedtoproducetransgenicpigs．Keyword：spermatogonialstemcells，pluripotentgermlinestemcells，transgenicpigII第一章引言第一章引言1．精原干细胞的研究现状对精原干细胞(spcrmatogonialstemcell，SSCs)的认识和研究已有好多年了。然而，直到上世纪90年代以前，人们对精原干细胞的研究，主要集中于精原干细胞的发育迁移、形态和自我更新等生理特征的研刭㈨，对精原干细胞的发育及自我更新的维持机制知之甚少。上世纪90年代的十年里，人们开始在分子水平上研究精原干细胞特征【7捌，期望能够在更深层次上了解精原干细胞，期间也有人开始对SSCs进行异体移植【她11】。正是由于人们在对SSCs的调节机制和细胞因子对SSCs的作用认识不断积累的基础上，在1998年NaganoM等人开始对在体外培养SSCs的条件进行探索【12】，从此随着对SSCs体外培养技术的不断完备，包括SSCs的富集分离【131和保存【悼151条件的改善，极大地促进了对SSCs的研究。SSCs的分离富积是对其研究与应用的必要前提条件。精原干细胞(spcrmatogonialstemcells，简称SSCs)是成年雄性动物体内产生精子的成体干细胞。它具有干细胞自我增殖和分化的能力，通过自我增殖维持它在睾丸内的数量，同时通过逐级分化产生精子维持雄性动物的生殖能力。精原干细胞也是雄性动物唯一可以将遗传物质遗传给后代的成体干细胞。正常情况下，精原干细胞在体内只具有分化为精子的能力，因此它只有单向分化能力。精原干细胞由原生殖细胞(primordialgermcell，PGC)发育分化而来。PGC在受精后7天在外胚层(epiblast)受周围体细胞信号