林肯链霉菌产林可霉素发酵培养基优化.docVIP

表格清单 表1-1主要仪器---------------------------------------------------4 表1-2主要试剂---------------------------------------------------4 表2-1 种子代谢状况--------------------------------------------10 表2-2 正交试验的因素水平表----------------------------------------11 表2-3 正交试验L9(34)结果处理-------------------------------------12 表2-4磷酸二氢钾对产生林可霉素的影响结果-------------------------13 表3-5 前体酪氨酸对产生林可霉素的影响测量结果--------------------14 图表清单 图1林可霉素结构式------------------------------------------------3 图1-1葡萄糖标准曲线----------------------------------------------7 图1-2平板效价图---------------------------------------------------8 图2-1 菌种在不同时期的菌体状态------------------------------------10 图2-2 不同时间正交试验结果线形图------------------------------------13 图2-3磷酸二氢钾对产生林可霉素的影响结果柱形图--------------------14 图2-4前体酪氨酸对产生林可霉素的影响测量结果柱形图-----------------16 引 言 林肯链霉菌是放线菌属中链霉菌的一种，基丝无横隔，直径大约为0.5-0.8μ m。可产生一种林可胺类碱性物质---林可霉素。 林可霉素一种林可胺类抗生素，对多数革兰氏阳性菌有较强抑菌活性，特别是对链球菌、肺炎球菌、金黄色葡萄球菌及厌氧菌的抗菌作用尤为明显。在人体内分布广泛，对于呼吸系统、骨髓炎及软组织感染等疾病有很好的治疗作用，尤其适用于对青霉素过敏的病人[1]。因此林可霉素具有很重要的药用价值，同时在工业上也具有很重要的经济价值。 林可霉素含A、B两组分，其主要成分为A组分，分子式为C18H34N2O6S，相对分子量为406.56，其结构见图1。两组分在结构上的区别为：A组分在4位上为正丙基，而B组分为乙基，B组分无抑菌作用。 在当今科技发达的时代，生物产品已经成为时代的主流。林可霉素作为临床应用的主要抗生素也是人们研究的热点。目前国外对林可霉素的研究主要集中在基因调控、代谢及作用机理方面的研究[2-4]。国内大部分研究的是其工业应用方面，如菌种的诱变筛选等[5-7]。但是一个好的菌株出现，不仅仅是诱变筛选的结果，只有选择最佳的生长环境和代谢合成产物的最佳环境才能最大限度的发挥出菌株的潜在能力，实现研究的最高价值。正因为培养基在生产中的重要地位，培养基的优化也成为目前研究的重点，如童婷[8]、周晓荣[9]所做的关于培养基成份的优化等方面的研究。 碳源是发酵过程中合成菌体及抗生素的能量和碳素来源；氮源是用来构成菌体的蛋白质、核酸等含氮物质以及抗生素等含氮代谢产物的；磷是核酸和蛋白质的必要组成成分，也是重要的能量传递者---ATP的主要成分；酪氨酸是林可霉素合成的前提物质，培养基成分中酪氨酸的含量对产量有一定的影响。 鉴于碳氮源、磷酸盐和前体物质的重要性。本实验选择了以淀粉、葡萄糖（碳源），玉米浆、豆饼粉（氮源），磷酸二氢钾（磷酸盐）和前体酪氨酸等因素为研究对象，以确定林可霉素发酵的最佳培养基配比。 第一章 材料与方法 1.1试验菌 林肯链霉菌SL-98、藤黄八叠球菌（由安徽工程科技学院生物技术实验室提供）。 1.2 实验主要仪器 表1-1主要仪器 仪器名称 产家 恒温恒湿振荡培养箱SPH-2102C SPX-250BS-Ⅱ生化培养箱 电子天平FC104双圈牌 恒温水浴锅HH-2 立式电热压力蒸汽灭菌器LDZX-50KBS PHSJ-3F实验室pH计 雷磁牌 离心机 显微镜XSP-2CA 滴定装置 培养皿 牛律杯 200ul移液枪 X57404E 游标卡尺LINKS BRAND 马头牌JYT-5架盘药物天平 隔水式电热恒温培养箱 电热恒温鼓风干燥箱 SW-CJ-2FD双人单面净化工作台 上海世平实验设备有限公司 上海新苗医疗器械制造有限公司 上海精科 国华电器有限公司 上海申安医疗器械厂 上海精密科学仪器有限公司 中外合资深圳天南海北有限公司 上海 天律市东丽教学仪器