红肉与白肉火龙果愈伤诱导的影响因素研究.docVIP

仲恺农业工程学院 毕 业 论 文 红肉和白肉火龙果愈伤诱导的影响因素研究 姓 名 院（系） 生命科学学院 专业班级 生物技术102班 学 号 指导教师 职 称 教 授 论文答辩日期 2014年 6月3日 仲恺农业工程学院教务处制 摘 要 本试验以不同培养基对红肉和白肉火龙果种子进行发芽以获得实生苗，并分别以实生苗的不同部位为材料，以及采用不同培养基和不同培养条件进行愈伤组织诱导，以研究火龙果愈伤组织诱导的影响因素。结果表明：白肉火龙果种子发芽及幼苗培养的最适培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L，红肉火龙果种子发芽及幼苗培养的最适培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.4mg/L，活性炭对火龙果种子幼苗培养影响不大。火龙果诱导愈伤组织以MS培养基，蔗糖30g/L， pH5.5-6.0为最佳，外植体以茎段为最佳。 关键词：火龙果 愈伤组织诱导 培养基 培养条件 目 录 1前言 6 2 材料与方法 6 2.1 实验材料 6 2.2实验方法 7 2.2.1 火龙果无菌苗的获得 7 2.2.2 愈伤组织的诱导 7 2.2.2.1 不同外植体对愈伤组织诱导的影响 7 2.2.2.2 不同火龙果品种对愈伤组织诱导的影响 7 2.2.2.3 无机盐浓度对愈伤组织诱导的影响 8 2.2.2.4不同蔗糖浓度对愈伤组织诱导的影响 8 2.2.2.5 不同pH值对愈伤组织诱导的影响 8 3 结果与分析 8 3.1不同激素组合对火龙果无菌苗培养的影响 8 3.2 白肉火龙果不同外植体对火龙果无菌苗愈伤组织诱导的影响 9 3.3不同的果肉类型对火龙果无菌苗愈伤组织诱导的影响 9 3.4 无机盐浓度对火龙果无菌苗愈伤组织诱导的影响 10 3.5 不同蔗糖浓度对白肉火龙果无菌苗愈伤组织诱导的影响 10 3.6 不同pH值对白肉火龙果无菌苗愈伤组织诱导的影响 10 4结果与讨论 11 4.1 培养无菌苗培养基选择 11 4.1.1 不同激素配比 11 4.1.2 活性炭影响 11 4.2 火龙果诱导愈伤组织培养基选择 11 4.2.1 基本培养基选择 11 4.2.2 培养基蔗糖浓度 12 4.2.3 培养基的pH值 13 参考文献 14 英文摘要 15 致谢 16 1 前言 火龙果(Hylocereus undatus Britt ＆Rose)又名红龙果、芝麻果、仙蜜果、青龙果等，为仙人掌科量天尺属的果用栽培种[1]。该植物原产于中美洲热带地区，其花与果均可食用，是当地传统的食物和重要的经济作物。20世纪80年代末90年代初由美洲引种到台湾[2]。火龙果茎和花朵因渗透压极低而具备的独特的黏液中，含有大量药效显著的营养性物质和治疗性物质。其花可清火、润肺、止咳，对肺结核、支气管炎、颈部淋巴结核有辅助治疗作用[3]。火龙果高纤维，低热量，富含维生素B1、B2、B3、C,葡萄糖,矿物质,以及多种微量元素，果色鲜艳美丽,果肉鲜美脆甜,深受人们的欢迎[4]。 目前，火龙果在生产上大多采用扦插或嫁接繁殖，繁殖速度相对较慢，种源数量有限, 且易受环境条件限制, 不利于大规模生产和品种改良[5]。陈广超等[6]研究表明采用腋芽增殖途径进行火龙果的快速繁殖效率高。黄青峰[7]研究认为火龙果的繁殖途径以腋芽增殖途径为主。林家耕和张树河[8]通过火龙果茎段繁殖获得了大量试管苗, 并且试管苗移栽成活率很高, 移栽成活的试管苗经生长一段时间后, 将茎段嫁接到强壮的三角柱砧木上, 能够保持品种的遗传物质稳定, 不易发生变异。因此, 腋芽增殖途径是保证火龙果品种质量、大量快繁的一个主要手段。火龙果的快速繁殖是提供生产用种苗的重要途径, 而火龙果遗传转化是提高种苗质量和改良火龙果品种的必需方式。但遗传转化的成功需要高效再生体系的建立, 愈伤组织的诱导是建立再生体系的基础和前提。然而, 有关火龙果红肉和白肉愈伤组织诱导对比以及愈伤组织培养影响条件研究不多。本研究试图通过组织培养手段, 建立火龙果的愈伤组织诱导和对比性研究, 以期为火龙果的定向培育及遗传转化等方面的研究提供基础手段和理论依据。 本试验以不同培养基对红肉和白肉火龙果种子进行发芽以获得实生苗，并分别以实生苗的不同部位为材料，以及采用不同培养基和不同培养条件进行愈伤组织诱导，以研究火龙果愈伤组织诱导的影响因素。 2材料与方法 2.1实验材料 实验材料是白肉和红肉火龙果，购买于水果批发市场。果实过纱布包裹除去果肉，流水冲洗除去多余的果胶获得种子。 2.2实验方法 2.2.1火龙果无菌苗的获得 火龙果种子以10%次氯酸钠灭菌9min，然后用1‰氯化汞灭菌8min，蒸馏水冲洗4-5次，接种到14种不同的种子发芽培养基