体液电解质与微量元素检验ppt课件.ppt

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体液电解质与微量元素检验ppt课件

【临床意义】 1、尿钙增高主要见于甲状旁腺功能亢进症、维生素D中毒、维生素A中毒、肾上腺皮质功能亢进症、肢端肥大症、肝豆状核变性、特发性高尿钙症等。 2、尿钙降低主要见于甲状旁腺功能减退、维生素D缺乏、乳糜泻、尿毒症晚期、阻塞性黄疸等。 (二)血清无机磷和尿磷的检测 人体内的磷元素尚不能直接测定。通常测定的磷是指血浆中无机磷酸盐(H2PO4-、HPO4 2-)所含的磷。 测定血清磷的决定性方法是放射性核素稀释质谱法(ID-MS法),WHO推荐的常规方法是比色法,我国卫生部临床检验中心(1997年)推荐的常规方法是以硫酸亚铁或对甲氨基酚硫酸盐(米吐尔)做还原剂的还原钼蓝法,实验室现多采用紫外分光光度法。 1.血清磷的检测 ⑴紫外分光光度法 原理:血清中无机磷在酸性溶液中与钼酸铵反应生成的磷钼酸铵复合物,在340nm或325nm处的吸光度值与无机磷含量成正比,与同样处理的标准品比较,即可计算出标本中无机磷的含量。 评价:本法反应快速,操作简便,可用于自动化生化分析测定。但黄疸、溶血、高脂血清在340nm波长处有吸收,必须做标本空白对照。 ⑵硫酸亚铁磷钼蓝比色法 还原剂 磷酸盐+钼酸 磷钼酸 钼蓝 (无色) (蓝色) 还原剂有:硫酸亚铁铵、米吐尔、邻苯二胺、氯 化亚锡等。 无蛋白血滤液法:三氯乙酸沉淀蛋白质。 不除蛋白法:表面活性剂Triton X—100。 ⑶米吐尔直接显色法 无机磷在酸性溶液中与钼酸铵反应生成磷钼酸铵复合物,用还原剂对甲氨基酚硫酸盐(米吐尔)还原生成钼蓝。在试剂中加入吐温-80以抑制蛋白质的干扰。 (4)酶法 嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)和黄嘌呤氧化酶(XOD)偶联并以过氧化物酶(POD)为指示剂的方法,可用于常规标本的自动分析 。 PNP HPO42-/H2PO4- + 次黄嘌呤核苷 核苷-1-磷酸+次黄嘌呤 XOD 次黄嘌呤+2O2+2H2O 尿酸+ 2H2O2 POD 2H2O2 + 4-AAP + EMAE 醌亚胺 【参考区间】 紫外分光光度法:0.9~1.34mmol/L 硫酸亚铁磷钼蓝比色法: 健康成年人:0.96 ~ 1.62mmol/L 儿 童:1.45 ~ 2.10mmol/L 【临床意义】 血清无机磷增高:①甲状旁腺功能减退症;②慢性肾炎晚期;③维生素D过多;④多发性骨髓瘤及骨折愈合期。 血清无机磷降低:①甲状旁腺功能亢进症;②佝偻病或软骨病伴有继发性甲状旁腺增生;③连续静脉注入葡萄糖并同时注入胰岛素或胰腺瘤伴有胰岛素过多症,;④肾小管重吸收磷功能发生障碍。 2.尿磷的检测 尿磷的检测方法与血磷相同,取24小时混合尿,并在尿样收集容器中预先加入浓度为6mmol/L的HCl120ml,以防碱性尿磷酸盐沉淀析出,分析之前应对尿液进行稀释、过滤。 【参考区间】 硫酸亚铁磷钼蓝比色法: 16.14~41.98mmol/24h 【临床意义】 从尿中排出的磷为无机磷,主要是HPO42-及H2PO4-的混合物。尿磷排泄增多见于甲状旁腺功能减退、甲状旁腺切除、肾衰竭、伴有酸中毒的肾炎等患者。 (三)血清镁和尿镁的检测 参考方法:原子吸收分光光度法 常用方法:分光光度法(MTB、Calmagite法) 分光光度法准确度和精密度较好,且适宜自动化分析,在临床实验室广泛使用。 最近又发展了酶学方法用于血清镁的测定。 1、血清镁的测定 ⑴原子吸收分光光度法 原理:镁的空心阴极灯(镁灯)发射特征性的285.2nm光谱,在通过火焰时被待测标本中处于基态的镁原子蒸汽所吸收,其光吸收的量与火焰中镁离子的浓度成正比。 在相同条件下,本法可对同一份标本同时进行钙、镁的测定。因其特异性强,灵敏度和准确性高,已成为镁测定的参考方法。特别适宜测定生物体液中镁的浓度,在临床上被广泛使用。 ⑵MTB法 原理:在碱性条件下,MTB可与镁络合成蓝紫色复合物,由于MTB还可与钙络合,故需加入特殊的钙螯合剂乙二醇双(β-氨基乙醚)N,N,N′,N′-四乙酸(Et

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